基因工程22课件.pptVIP

基因工程 （二） DNA 直接转移法 农杆菌侵染双子叶植物获得转基因植株是非常成功的，但自然界中的农杆菌只侵染双子叶植物，对单子叶植物不敏感。虽然通过添加乙酰丁香酮类物质可使农杆菌侵染单子叶植物，但单子叶植物的再生比较困难，因而农杆菌转化单子叶植物仍然是比较困难的。 超螺旋结构的细菌质粒，虽然不能在植物细胞中复制，但可以重组整合到植物染色体内。受这一现象的启发产生了基因直接转移技术。重组机制并不清楚，因为细菌质粒与植物DNA之间没有同源性，事实上整合是随机发生在植物染色体的任何位点。 DNA 直接转移法种类 基因枪法 原生质体法 脂质体法 花粉管通道法 电激转化法 PEG介导转化方法等。 （1）定义 基因枪法（particle gun）又称微弹轰击法（microprojectile bombardment, particle bombardment, biolistic)。 它是把遗传物质或其它物质附着于高速微弹上直接射入组织、细胞、细胞器内，完成整合并表达的基因转化方法。 “Gene Gun” Technique （2）动力系统 炸药爆破力 高压气体 高压放电 （3）DNA颗粒载体的制备 利用CaCl2对DNA沉淀作用；亚精氨、PEG的 粘附等作用将DNA固定在颗粒表面 。 （4）金属颗粒