003-生物技术细胞-2011课件.pptVIP

十二.蛋白芯片:检测基因表达 第三章. 细胞生物学技术西安交通大学医学院遗传与分子生物学系胡晓岩 模型生物 第一节.显微镜技术 一.显微镜与分辨率： 人的肉眼分辨率为0.2mm, 光镜分辨率为0.2μm, 电镜分辨率为0.2nm。 分辨率(resolution)是指将临近两点清晰区分辨认的能力,以r表示: r = 0.61λ/n sinα 分辨率取决于光的波长(λ)和物镜的数值孔径(numerical aperture, NA)。 λ=0.53μm，n sinα 即NA (干透镜最大不超过1, 油镜可达1.4)。 二.光学显微镜技术： 标本制备:材料的固定→包埋→切片→染色 1.普通光学显微镜:最大分辨率为0.2μm 2.荧光显微镜:揭示细胞或细胞间质中的大分子 3.相差显微镜:直接观察活细胞 4.激光扫描共聚焦显微镜:获得细胞结构的三维图象 5.荧光漂白恢复技术:检测活体细胞表面或内部分子运动情况 三.电子显微镜技术： 1.电子显微镜的种类： 透射电镜、扫描电镜、分析电镜、高压电镜 2.电镜样品制备技术： ①. 超薄切片术:样品固定→脱水→包埋(树脂)→超薄切片(约50nm厚)→捞于铜网上→染色(重