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第九章 免疫学应用 一、免疫学检测原理与方法及其应用 （一）抗原抗体结合反应的特点与影响因素 抗原抗体反应的特点 特异性： 一抗 二抗 抗血清 可逆性：非共价结合 解离条件：低pH、高浓度盐、冻融 可见性：沉淀物或凝集物 影响抗原抗体反应的因素 （二）抗原抗体反应的基本检测方法 凝集反应 直接凝集：颗粒性抗原与相应抗体在电解质的参与下，直接结合，凝集成团的现象，称直接凝集试验。 凝集反应 间接凝集：将可溶性抗原包被在一种与免疫无关的、一定大小的载体颗粒的表面，然后再与相应的抗体反应，在有电解质存在的适宜条件下，所出现的特异性凝集反应为间接凝集试验。 （正向）间接凝集反应原理示意图 （反向）间接凝集反应原理示意图 沉淀反应 血清蛋白质、细胞裂解液或组织侵液等可溶性抗原与相应抗体结合后出现沉淀，此类反应称为沉淀反应。 单向扩散 免疫电泳 用途： 分析标本中所含抗原成分的性质和含量； 观察Ig异常增多和缺失； 传染病的快速诊断等。 免疫荧光法 用荧光素与抗体连接成荧光抗体，再与待测标本中的抗原反应，置显微镜下观察抗原抗体复合物散发荧光。 常用荧光素：异硫氰酸荧光素和藻红蛋白 用于鉴定或定位标本中的抗原 直接荧光法 一抗 间接荧光法 二抗 间接荧光法 酶免疫测定 抗原抗体反应的特异性与酶催化作用的高效性相结合，进行酶与底物的显色反应 常用酶：辣根过氧化物酶和碱性磷