2-蔗糖酶的催化反应及活力测定课件.pptVIP

蔗糖酶的催化反应及活力测定 一.实验目的 1.学习掌握3，5-二硝基水杨酸比色 定糖的原理和方法； 2.学习掌握酶的活力测定及其计算 方法。 二.实验原理 蔗糖酶活力测定的原理 1.蔗糖 D-果糖 + D-葡萄糖 （非还原糖） （还原糖） 2.酶活力=酶活力单位/ml=U/ml 3.酶活力单位：在本实验条件下，每min释放1mg 还原糖所需的酶量定义为一个酶活力单位 1U=1mg/min 二.实验原理 3，5-二硝基水杨酸比色定糖的原理 1. DNS试剂+ D-葡萄糖 氨基化合物 （还原糖） （棕红色） 2.在一定范围内还原糖的量与棕红色物质的颜色强度成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定吸光度，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖的量 三、试剂和器材 （一）试剂： 1. 蔗糖酶溶液 2. 5%的蔗糖溶液 3. DNS （3,5二硝基水杨酸试剂) 4. 1mol/L的 NaOH溶液 5. 2mg/ml的葡萄糖标准液 （二）器材： 1．移液管、吸耳球 2．试管、血糖管（或刻度试管） 3．秒表 4．沸水浴