9.基因工程应用课件1.pptVIP

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结论 利用基因工程的手段可以成功地解决某些化学(生物)工程问题,其效率和效益是非常明显的。除了以上的例子外,其的用武之地还十分广阔。 2.植物抗虫基因工程的研究进展 研究意义: 虫害是制约农作物高产的重要因素,世界每年因虫害造成的损失约占农作物总产量的15%以上。化学农药的施用在减少虫害的同时引起一系列副作用,如提高成本、污染环境、诱导害虫产生抗药性、引起次要害虫的大发生等。 而通过基因工程手段培育抗虫新品种(系)可从根本上解决问题,对哺乳动物和一些有益昆虫不产生毒害作用,且不造成环境污染,具有广阔的应用前景。 研究优势: 利用基因工程手段培育抗虫新品种有以下优点: (1)保护作用具有连续性; (2)基因资源非常丰富; (3)对害虫的毒性具有专一性; (4)对害虫的毒害作用可不受时,空的限制; (5)不易被环境因素影响,也不对环境造成污染; (6)育种周期短,成本低,目的性强。 1. 抗虫基因 1.1 来源于微生物的抗虫基因 1.1.1 苏云金杆菌毒蛋白基因(Bt基因) Bt是苏云金杆菌Bacillus thuringiensi的简称,是一种革兰氏阳性土壤芽胞杆菌,其杀虫毒性来自芽孢形成时所产生的具有高度特异性杀虫活性的晶体蛋白,通常称为苏云金杆菌毒蛋白(Bt toxic protein) 、杀虫结晶蛋白(insecticidal crystal protein,ICP) 、 δ内毒素等。 通过克隆技术确定Bt基因位于30~150MD大小不同的质粒上,其中毒性区间位于该序列N端29~607个编码区,C端有高度的保守性,对稳定晶体蛋白结构可能起着重要作用。 杀虫机理:其中,应用于农业生产的主要是δ内毒素。已知δ内毒素为130~160KD的多肽,在伴孢晶体内是以原毒素的形式存在,经体外碱解或在昆虫肠道内被蛋白酶水解成55~70KD或更小的多肽,与敏感昆虫中肠道上皮纹缘细胞上的特异受体位点结合,并破坏纹缘膜细胞渗透压平衡,使细胞裂解,杀死昆虫。 分类:不同基因型杀虫谱不同,毒蛋白的大小及形状也不一样。根据杀虫谱的不同,将杀虫基因分成六大类,统称为Cry基因,用罗马数字Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ等来命名,分别代表几种杀虫范围。 在烟草中进行了在后代中删除Bt基因的实验, PCR鉴定证明转基因烟草后代中Bt基因已被删除。 对转基因烟草进行了生物抗虫性试验,结果显示,未含有Bt基因的烟草棉铃虫不会被杀死,而含有Bt基因的烟草则毒杀了棉铃虫。 1.1.2 其他来源于微生物的抗虫基因 来源于根癌农杆菌的异戊烯转移酶(IPT)基因编码细胞分裂素生物合成途径中的一个关键酶,在烟草,番茄中表达后,可减少烟草夜蛾对叶片的损伤,并降低桃蚜的生存力。 胆固醇对细胞膜的完整性和功能是必需的。来源于链霉菌类的胆固醇氧化酶对棉铃象甲幼虫有极高的毒性,并能延缓美洲烟草夜蛾的生长。 1.2 来源于高等植物的抗虫基因 目前,从高等植物获得的抗虫物质主要有两大类: 一类是动物消化酶的抑制剂(包括蛋白酶抑制剂和淀粉酶抑制剂); 另一类是植物凝集素。 1.2.1 蛋白酶抑制剂类抗虫基因 蛋白酶抑制剂(PI)基因表达的蛋白酶抑制剂是一类存在于许多植物的贮藏器官(如种子和块茎中)的蛋白质,最早发现于1938年,其含量高达总蛋白的1%~10%。昆虫体内的蛋白酶负责食物中蛋白质的消化,将蛋白酶抑制剂基因引入植物,即可通过影响昆虫的消化作用而致昆虫死亡 。 优点:具有抗虫谱广,对人畜无副作用及昆虫不易产生耐受性等,是一类天然的抗虫物质。 1.2.2 植物凝集素基因 外源凝集素基因是一类糖结合蛋白,在自然界中分布十分广泛,是植物防御系统的一个组成部分。 凝集素抗虫的作用机制可能是在昆虫肠腔部位与糖蛋白结合,降低膜透性,从而影响营养物质的正常吸收,同时诱发病灶,促进消化道内细菌繁殖,使昆虫得病或引起拒食,生长停滞甚至死亡 1.3 来源于动物的抗虫基因 动物来源的抗虫基因主要有4类,一是丝氨酸(Ser)蛋白酶抑制剂基因,二是昆虫毒素基因,三是几丁质酶基因,四是体激素基因。 现在人们发现,来源于哺乳动物和烟草夜蛾的Ser蛋白酶抑制剂是很有发展前景的抗虫蛋白。而来源于蝎子,蜘蛛,胡蜂,蚂蚁等捕食性动物的昆虫毒素基因编码的蛋白分子量小,这些毒素一般都能专一性作用于昆虫而对哺乳动物无害或毒性很小,这些毒素基因也已开始应用于基因工程 。 2.利用基因工程改善棉纤维的品质 利用基因工程改善棉纤维的方法主要有两种基本途径: 一是增加或减少与某些棉纤维品质相关的蛋白质或酶的表达水平。这一途径需要分离鉴定出与棉纤维相关的基因。目前的工作主要是试图分离鉴定那些仅在或主要在纤维细胞内表达基因。一般认为在纤维细胞内特意表达的基因可能对纤维发育起重要作用。 二。从其他

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