模块2驱蚊草等生根培养基的配制及灭菌课件教学.pptVIP

引言 蚊净香草(Mozzie buster),又叫驱蚊草，是由中科院利用转基因技术将澳洲天竺葵与香茅草杂交培育而成的。由于它能释放一种能使人愉悦、抗忧郁、消除有害气体、紧张与压力的物质，倍受人们喜爱，很快就在国内流传开来。 引言 薫衣草是唇形科薰衣草属多年生植物，用途十分广泛．其干燥花在医药上可作为镇静、驱风、利尿、兴奋、强壮药。提取的精油可用作防腐剂、镇静剂、驱风剂，并可作为高级香水、香皂、洗涤用品的香料。 另外，它还可作为观赏植物和蜜源植物栽培。 一、实验目的 理解液体培养基在促进试管苗生根方面的作用 掌握蚊净香草和薫衣草生根培养的液体培养基的配制技术 熟悉接种器具的包扎方法 明确配制培养基及其灭菌过程中的关键 二、实验内容及其步骤 培养基的配制与分组 接种器具的包扎 灭菌 1、培养基的配制与分组 培养基配方与分组 蚊净香草 : 第1小组配制：MS + NAA0.05 + 0.1%LH + 3%蔗糖 pH调至5.8 第2小组配制：1/2 MS + NAA0.05 + 0.1%LH + 3%蔗糖 pH调至5.8 薫衣草： 第3小组配制：MS+NAA0.5+2%蔗糖 pH调至5.8 第4小组配制：1/2 MS+NAA0.5+2%蔗糖 pH调至5.8 1、培养基的配制与分组 培养基配制步骤 准备和检测母液 称取蔗糖和LH 汲取母液 定容 测定和调节pH 分装 封口和帖标签 1、培养基的配制与分组 培养基配制步骤 准备 称取蔗糖与水解乳蛋白 1、培养基的配制与分组 培养基配制步骤 准备 称取蔗糖与水解乳蛋白 汲取母液 1、培养基的配制与分组 培养基配制步骤 准备 称取蔗糖与水解乳蛋白 母液汲取 定容 1、培养基的配制与分组 培养基配制步骤 准备 称取蔗糖与水解乳蛋白 母液汲取 定容 测定和调节pH 1、培养基的配制与分组 培养基配制步骤 准备 称取蔗糖与水解乳蛋白 母液汲取 定容 pH测定 分装、封口和帖标签 1、培养基的配制与分组 配制培养基应注意： 计算和称量要精确 精确调节至pH5.8 分装时每瓶培养基要均匀 2、接种器具的包扎 器材： 椭圆形盆子、聚丙烯薄膜、粗棉线等 包扎过程 注意事项 封口朝内 粗棉线包扎要结实 不要打死结 3、灭菌 步骤 取锅装水 装料封盖 加热放锅内冷空气 升温至121℃计时 3、灭菌 步骤 取锅装水 装料封盖 加热放锅内冷空气 升温至121℃计时 保持121±1 ℃下20分钟 3、灭菌 步骤 取锅装水 装料封盖 加热放锅内冷空气 升温至121℃计时 保持121±1 ℃下20分钟 自然冷却，注意安全 取出物料并储存 3、灭菌 注意事项 检查锅底水位 加盖时要对角均匀用力旋紧螺丝。 放冷气时压力不能过高，要根据我教你们的经验进行。 121℃时开始计时，温度严格 控制在121±1 ℃，保温20min，时间不能太短，也不能过长 不耐热用品、药剂不能一起灭菌 装锅时培养瓶倾斜度不能太大，也不能装得太满 注意安全，正确冷却。当压力表指针到0时，先打开放汽阀，后打开盖子，取出培养基自然冷却。 三、实验报告及思考题 实验报告 根据一定格式写出今天实验的报告(如右图所示) 思考题 液体培养基在促进试管苗生根方面有何意义？ 培养基配制及灭菌时应注意哪些方面？ 空气排除度对灭菌温度的影响 馋死 驱蚊草成株 驱蚊草试管苗移栽驯化 薫衣草的驯化移栽苗 薫衣草的开放花朵 从冷藏箱中取出母液，检查并按顺序摆放 微量移液器与 吸量管及吸耳球有序摆放 准备一桶清水 量取适量的蒸馏水 水位与搁架平 对角旋紧螺帽，用力均匀 请看准指针所对位置 一定要待指针到0，先打开放汽阀，然后才能打开盖子，切记! 121 128 134 2.10 115 124 130 1.75 109 118 126 1.40 100 112 121 1.05 90 105 115 0.70 72 94 109 0.35 不排除空气 排除1/2空气 纯蒸汽 锅内温度/℃ 压力表读数 Kg/cm2 在线教务辅导网： 更多课程配套课件资源请访问在线教务辅导网