创新设计-学业水平考试2016-2017高中生物（浙江专用浙科版）选修三 课件 第二章 克隆技术2-5 .ppt

第5课时　动物的克隆 【学考报告】 一、动物细胞的培养和克隆形成 2．动物细胞培养 (1)培养过程 (2)原代培养和传代培养 将动物组织通过酶或机械方法分散成单个细胞后进行的初次培 养，称为 。初次培养的细胞生长、繁殖一定时间后， 由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，影响细胞的生长，因此需要重新用胰蛋白酶等处理，进行分瓶扩大培养，称为 。 小贴士　细胞贴壁和接触抑制 (1)细胞贴壁：将培养液中分散的动物细胞放入培养瓶中，置于适宜的条件下培养，细胞很快会贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 (2)接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 注意　①打破接触抑制现象的方法：将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。②癌变细胞没有接触抑制现象。 3．动物组织培养 (1)概念：动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或 特性。 (2)结果：由于细胞的运动、变化和培养物的组织成分发生变化，长期的培养结果最终成了简单的 。 (3)在广义的组培中还包括器官培养，即 、器官的 一部分或 在体外和人工控制的条件下得以保存、生 长，在此过程中保持器官的结构、功能及 能力。 4．细胞系和细胞株 (1)细胞系：可 的细胞。原代培养物在首次传代时就 成为细胞系，能连续培养下去的细胞系称为 细胞系，不 能连续培养下去的细胞系称为 细胞系。二倍体细胞通常 为有限细胞系。连续细胞系被认为是发生转化了的细胞系，大多数具有 。有的连续细胞系是 ， 具有异体致瘤性；有的连续细胞系获得了不死性，但保留 现象，不致癌。 (2)细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的 的细胞称为细胞株。细胞株一般具有 恒定的 、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等。 可以连续多次传代的细胞株称为 细胞株，可传代次数有限 的细胞株称为有限细胞株。 5．克隆培养法(或细胞克隆) (1)概念：把一个 从群体中分离出来单独 培养，使之繁衍成一个新的 的技术。 (2)结果：由于来源于一个共同的祖细胞，所以称为 ，也就是克隆。 (3)提高细胞克隆形成率的措施：选择适宜的培 养基、添加 、以滋养细胞支 持生长、 刺激、使用CO2培养 箱、 等。 【典例剖析】 如图是动物细胞培养的基本过程示意图，请据图回答。 (1)动物细胞培养的理论基础是 (　　) A．细胞分化 B．细胞增殖 C．细胞全能性 D．细胞膜流动性 (2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是________，然后用________酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是______________。 (3)培养首先在B瓶中进行。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为________。 (4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用________处理，然后配制成________，再分装。 (5)在C瓶中正常培养细胞的过程称为________。 解析　(1)动物细胞培养理论基础是细胞增殖。(2)在进行培养时应尽量使细胞分散，便于与培养液充分接触进行物质交换，使其分散需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。(3)培养的过程分为原代培养和传代培养两个大阶段。当培养到第10代左右，出现许多细胞衰老死亡现象，这时为原代培养。(4)用胰蛋白酶处理使细胞从玻璃瓶壁上脱离下来，配制成细胞悬浮液继续培养。(5)在C瓶中的培养属于传代培养。 答案　(1)B (2)剪碎组织　胰蛋白　使细胞与培养液充分接触 (3)原代培养 (4)胰蛋白酶　细胞悬浮液 (5)传代培养 动物细胞培养中的“四个2” (1)培养过程为“2”：原代培养、传代培养。 (2)传代细胞为“2”：细胞株、细胞系。 (3)细胞生长特点为“2”：贴壁生长、接触抑制。 (4)胰蛋白酶使用为“2”：分散组织块、分散贴壁生