分子生物学技术3幻灯片.pptVIP

分子生物学实验技术 几种常用PCR技术 1）、差异显示PCR 2）、内参照相对定量PCR 3）、实时PCR用于基因拷贝数分析 均可用作对基因拷贝数的分析，即对DNA，RNA进行定量分析 1、转基因技术是指将外源基因导入受精卵细胞，胚胎干细胞中（或其它受体细胞），通过外源基因与受体细胞染色体DNA之间随机重组的发生而将外源基因插入到受体细胞染色体DNA分子上的过程。 2、 利用转基因技术可以制备转基因动物（植物）或转基因细胞。并被转入外源基因的动物或细胞能将将外源基因遗传给后代。 反义RNA调控 1984年Adelman等发现大鼠的促性腺激素释放激素（gonadotropin releasing hormone,GnRH）的基因两条链都能转录，首次在真核中发现了反义RNA。 在线虫（C.elegans）中，控制幼虫发育的基因lin 14基因受到lin 4基因的反义调节。这是一种对翻译模板的抑制来进行调控的途经。 图二：不同哺乳动物细胞对siRNA诱导的基因沉默的易感性。 如图所示的细胞株分别用化学合成和体外转录制备的siRNA转染。48小时后收获细胞，分离纯化RNA，变性胶电泳，Northern分析GAPDH探针和 cyclophilin, 和28S rRNA对照。 报告基因： 这种基因所产生的蛋白或某种信号很容易