人教版必修二第六章第2节基因工程及其应用概要.ppt

？如何让大肠杆菌生产人胰岛素？ DNA聚合酶 DNA连接酶 3、基因的运载工具——运载体： 种类：常用的运载体主要有两类： 1）质粒 2）噬菌体或某些动植物病毒 基因工程最常用的运载体是_______ 质粒 1、质粒存在于细菌、酵母菌等生物中，是细胞染色体外能够进行自主复制的很小的环状DNA分子。 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒。其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因和抗青霉素基因。 2、质粒的存在对宿主细胞无影响，但复制只能在宿主细胞内完成。 质粒适于做运载体的原因： 标记基因，便于进行检测。 （1）能在宿主细胞中复制并稳定保存 （2）具有多个限制酶的切点，便于与外源基因连接。 （3）具有某些标记基因，便于筛选 运载体的特点（具备条件） 作用： 作为运载体，将目的基因送入受体细胞，用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 原理： 利用运载体侵染宿主细胞的能力，将目的基因导入宿主细胞。 1)提取目的基因 2)目的基因与运载体结合 3)目的基因导入受体细胞 4)目的基因的检测和表达 （四）基因工程的步骤 目的基因是人们所需要转移或改造的特定基因。 如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因，还有植物的抗病（抗病毒、抗细菌）基因、种子贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。 步骤一：提取目的基因 方法： 1、直接分离：鸟枪法 2、人工合成： 注意：要保持基因的完整性 1.用一定的_________切割 质粒，使其出现一个切 口，露出____________。 2.用_____________切断目 的基因，使其产生_____ ____________。 3.将切下的目的基因片段插入质粒的______处， 再加入适量___________，形成了一个重组 DNA分子（重组质粒） 限制酶 黏性末端 同一种限制酶 的黏性末端 切口 DNA连接酶 相同 步骤二：目的基因与运载体结合 目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。 提问：要想将某个特定基因与质粒相连，需要几种限制性内切酶和几种DNA连接酶处理？ 思考：所有受体细胞都能摄入重组DNA分子吗？ 在全部受体细胞中，真正能摄入重组DNA分子 的受体细胞是很少的。 步骤三：目的基因导入受体细胞 1、常用的受体细胞： 大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等 2、常用微生物作受体细胞的原因： 微生物增殖快、代谢快、目的产物多 2、受体细胞摄入重组DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗？ 不能。有些受体细胞即使摄入重组DNA分子但目的基因并不一定能完成表达。 3、受体细胞摄入重组DNA分子后，目的基因完成表达的标志是什么？ 受体细胞必须表现出目的基因所控制的特定性状，才能说明目的基因完成了表达。 步骤四：目的基因的检测和鉴定 提问：1、检测一般依据的原理是什么？ 检测：依据受体细胞是否具有质粒中的标记基因，判断目的基因是否导入。 标记基因是否表达 　　例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 从细胞中分离出DNA 从大肠杆菌中提取质粒 限制 酶 提取目的基因 限制酶 目的基因与运载体结合 DNA连 接酶 目的基因导入受体细胞 目的基因的表达与检测 ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ 1 2 基因工程的操作工具 1.基因的剪刀 ——限制性内切酶 2.基因的针线 ——ＤＮＡ连接酶 3.基因的运输工具 ——运载体 基因工程的操作步骤 1.目的基因的提取 2.目的基因与运载体结合 3.目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与表达 基因工程(gene engineering)的原理 1）以下说法正确的是 （ ） A 所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B 质粒是基因工程中唯一的运载体 C 运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D 基因控制的性状都能在后代表现出来 C 课堂练习 2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ） A 能复制 B 有多个限制酶切点 C 具有标记基因 D 它是环状DNA D 3)下列是由限制酶切割形成的DNA片段，能用相应DNA连接酶将它们恢复连接的组合是（ ） ①…