实验七环境因素对微生物的影响教材.ppt

一、实验目的 了解各种物理和化学因素对微生物生长的抑制作用 观察各因素对微生物生长抑制的强弱 二、实验原理 环境因素包括物理因素、化学因素和生物因素，不良的环境条件使微生物的生长受到抑制，甚至导致菌体的死亡。但是某些微生物产生的芽孢，对恶劣的环境条件有较强的抵抗能力。我们可以通过控制环境条件，使有害微生物的生长繁殖受到抑制，甚至被杀死；而对有益微生物，通过调节理化因素，使其得到良好的生长繁殖或产生有经济价值的代谢产物。 根据微生物对氧气的需求，可把微生物分为好氧菌、厌氧菌和兼性好氧菌。在鉴定细菌时，常以它们的好氧性作为指标。 pH对微生物生长的影响 温度是影响微生物生长的重要因素之一。根据微生物生长的最适温度范围，可分为高温菌、中温菌和低温菌，自然界中绝大部分微生物属于中温菌。 紫外线主要作用于细胞内的DNA，轻则使微生物发生突变，重则造成微生物死亡。紫外线照射的剂量与所用紫外光灯的功率(瓦数)、照射距离和照射时间有关。紫外线透过物质的能力弱，一层黑纸足以挡住紫外线的通过。 化学药剂对微生物生长的影响： 抑制或杀死微生物的化学因素种类极多，用途广泛，性质各异。其中表面消毒剂和化学药剂最为常见。表面消毒剂在极低浓度时，常常表现为对微生物细胞的刺激作用，随着浓度的逐渐增加，就相继出现抑菌和杀菌作用，对一切活细胞都表现活性。化学药剂主要包括一些抗代谢物，例如抗生素等。在微生物实验中，pH值的变化也对微生物生长有很大影响。 各种物理因素紫外线 作用于生物体DNA温度 作用于温度敏感型蛋白质 三、实验器材 菌液 大肠杆菌、金黄葡、枯草杆菌 器材 平皿、吸管、牛肉膏蛋白胨培养基、酒精灯、玻璃刮铲 试剂 75%乙醇、10%苯酚、30%甲醛、1%碘液、0.1%升汞、50U/ml的青霉素、链霉素、庆大霉素 仪器 水浴锅、紫外灯 四、实验步骤 化学因素制牛肉膏蛋白胨平板一块，取0.1ml金黄色葡萄球菌菌液涂布。划分五个等分区块，做好记号后在每个区块内分别放上75%乙醇、10%苯酚、30%甲醛、1%碘液、0.1%升汞的小滤纸片。倒置于37℃培养箱培养24小时 生物因素制牛肉膏蛋白胨平板2块，分别涂布大肠杆菌和金黄色葡萄球菌各0.1ml每个平板划分三个等分区块，做好记号后，在每个区块内分别放上50U/ml的青霉素、链霉素、庆大霉素的小滤纸片。倒置于37℃培养箱培养24小时 物理因素（1）紫外线实验流程 倒平板→涂布接种→紫外线处理→培养→观察比较→记录结果 实验步骤 A.标记培养基 ：取肉膏蛋白胨培养基平板3个，分别标明大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等试验菌的名称。 B.接种 ：分别用无菌吸管取培养18—20h的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌菌液0.1m1(或2滴)，加在相应的平板上，再用无菌刮铲涂布均匀。 C.紫外线处理 ：打开培养皿盖，用无菌黑纸遮盖部分平板，置于预热10一15min后的紫外灯下，紫外线照射20?min左右，取去黑纸，盖上皿盖。 D.培养 ：在37℃培养箱中培养  （2）温度实验流程 培养液→接种→高温→培养→观察比较→记录结果 ?实验步骤 ?A.选取培养基 ：取8支A培养液试管，按顺序从1到8编号。 B.接种 ：其中4支(例如1、3、5、7)培养液试管中各接入培养48h的大肠杆菌的菌悬液0.1m1，其余4支(2、4、6、8)?培养液试管中各接入培养48h的枯草芽孢杆菌的菌悬液0.1m1，混匀。 C.?高温水浴 ：将8支已接种的培养液试管同时放入100℃水浴中，10min后取出1至4号管，再过10min后，取出5至8号管。各管取出后立即用冷水或冷却。 D.?培养 ：将各管置于其最适温度的培养箱中培养24h。 E.?观察结果 ：依据菌株生长状况记录结果。以“一”表示不生长，“十’表示生长，并以“十”，“十十”，“十十十”表示不同生长量。  五、实验结果 测定各种化学物质产生的抑菌圈的大小，比较不同化学因素的抑菌能力？ 观察物理因素对微生物生长的影响。 观察生物因素对微生物生长的影响。 六、问题与讨论 请列举5种化学因素和两种物理因素对微生物生长的抑制作用及其机理。 你如何确定某一种理化因素是抑菌，杀菌或是溶菌？ * * 实验七 环境因素对微生物的影响 2006.04.18 生物因素青霉素 作用于细胞壁链霉素 rRNA等 产黄氢霉 测试菌 *