实验室方法确认教材.ppt

CNAS-CL09 实验室现场评审核查表 《检测和校准实验室能力认可准则在微生物检测领域的应用说明》 5.4.2* 实验室在采用新的方法进行检测前，是否对方法进行验证并保留验证记录？ 依据CNAS-CL01准则 实验室现场评审核查表 5.4 检测和校准方法及方法确认 实验室制定的方法或被实验室采用的方法，如果满足预期用途并经过验证，是否也予以使用？ 在引入检测或校准前，是否确认实验室能够正确地运用这些标准方法？ 如果标准方法有改变，实验室是否重新进行证实？ 应证实能力 依据CNAS-CL01准则 实验室现场评审核查表 5.4.5．方法的确认 5.4.5.1.实验室是否通过检查并提供客观证据，证实 某一特定预期用途的特定要求得到满足? 5.4.5.2实验室是否对非标准方法、实验室设计（制 定）的方法、超出其预定范围使用的标准方法、 扩充和修改过的标准方法进行确认，以证实该方 法适合于预期的用途？ 确认是否尽可能全面，以满足预定用途或应用领 域的需要？ 实验室是否记录所获得的结果、使用的确认程序 以及该方法是否适于预期用途的声明？ CNAS-CL10:2012《检测和校准实验室能力认可准则在化学检测领域的应用说明》 5.4.2 b) 实验室是否对首次采用的检测方法进行技术能力的验证，如检出限、回收率、正确度和精密度等？ 5.4.5 b) 实验室是否通过试验方法的检出限、精密度、回收率、适用的浓度范围和样品基体等特性来对检测方法进行确认？实验室是否能解释和说明检出限和报告限的获得？报告限是否设定在一定置信度下可获得定量结果的水平？ 依据CNAS-CL01准则 实验室现场评审核查表 5.4.3实验室制定的方法 实验室为采用自己应用而制定检测和校准方法过程的活动，是否是一种有计划的活动？ 是否指定具有足够资源的有资格的人员来进行该项活动？ 是否随着方法制定的进度加以更新计划，并确保在所有有关人员之间中有效沟通？ CNAS-CL10:2012 / 5.6 测量溯源性 5.6.1总则 实验室是否按检测方法的要求建立校准曲线？所用标样是否覆盖被测样品的浓度范围？ 最低浓度的标样是否在接近检测方法报告限的水平,并建立和执行线性校准曲线相关系数的准则？ 在分析测试中常会遇到处理两个变量之间的关系， 例如在建立校准曲线时需要了解被测组分的浓度和响应值之间的关系。两个变量x与y之间的关系存在着函数关系，y值随着x值按照确定的规律变化，由一个 xi值可以精确地求出yi值。 见图： (x,y)的散布图 y=f(x) 如回归函数是一个线性函数，则称变量间是线性相关的。一元线性回归方程：y=a+bx 由于存在测定误差， x与y不是函数关系，而是相关关系（相关关系是统计关系）。 a -截距 b-斜率 1.校准曲线的绘制 每种应用校准曲线的分析方法在初次使用时，可通过绘制校准曲线以确定它的检测上限，并结合检测下限确定其检测范围。绘制校准曲线应注意： 1）校准曲线一般可根据4-6个浓度及其测量信号响应值绘制； 2）测量信号值的最小分度应与纵坐标的最小分格相适应； 3）浓度的整数值应落在横坐标的中格或大格的粗线上，以便于分小格查阅，并尽量使校准曲线的几何斜率接近于1（与横坐标约成45度角），以使在两个轴上的读数误差相近。 4）校准曲线的斜率常因温度、试剂批号等条件的变化而变化。在测定未知样品的同时测绘校准曲线是最理想的。否则，应在测定未知样品的同时，平行测定线性范围内的中等浓度标准溶液和空白溶液各二份，取均值相减后，与以前绘制的校准曲线上相同点进行核对，二者的相对差值根据方法精度要求5-10%，否则应重新绘制校准曲线 2.校准曲线的相关系数 绘制校准曲线所依据的两个变量的线性关系，决定着校准曲线的质量和样品测定结果的准确度。 影响校准曲线线性关系的因素： 1）分析方法的精密度； 2）分析仪器的精密度； 3）量取标准溶液所用量器的准确度； 4）易挥发溶剂（如萃取反应显色物的有机溶剂）的挥发所造成的比色液体体积的变动幅度； 5）分析人员的操作水平。 由于存在测定误差，可用“相关系数”来判断校准 曲线的线性关系。如用4-6个浓度的标准溶液及其 测量响应值绘制的校准曲线，根据实验经验应力求 其相关系数的绝对值I r I=0.999。否则可参照上述 影响线性关系的诸因素，找出原因并尽可能加以纠正，重新测定和绘制新的校准曲线。 对于成熟的分析方法和熟练的分析人员如能细心操作能使校准曲线的相关系数绝对