5第五章分子生物学方法(上)要素.pdf

分子生物学 生态环境工程学院 第五章 分子生物学基本研究法（上） —DNA、RNA及蛋白质操作技术 （2学时） 第一节 重组DNA技术回顾 第二节 DNA基本操作技术 第三节 RNA基本操作技术 第四节 SNP的理论与应用 第五节 基因克隆技术 分子生物学 青海大学生物科学系 分子生物学研究之所以从20世纪中叶开始 得到高速发展，其中最主要的原因就是现代分 子生物学研究方法、特别是基因操作和基因工 程技术的进步。 DNA分子的切割与连接 核酸分子杂交 凝胶电泳 基因操作 细胞转化 核心技术 核酸序列分析 基因的人工合成 基因的定点突变 PCR扩增等 分子生物学 青海大学生物科学系 ?基因操作gene manipulation主要包括DNA分子的切割与 连接、核酸分子杂交、凝胶电泳、细胞转化、核酸序列 分析以及基因的人工合成、定点突变和PCR扩增等，是 分子生物学研究的核心技术。 ?基因工程genetic engineering是指在体外将核酸分子 插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组 合，使之进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持 续稳定的繁殖和表达。 ?基因工程技术其实是核酸操作技术的一部分。外源核酸分子在另 一种不同的寄主细胞中的繁衍与性状表达的过程。 ?事实上，这种跨越天然物种屏障、把来自任何生物的基因置于毫 无亲缘关系的新的寄主生物细胞之中的能力，是基因工程技术区 别于其它技术的根本特征。 分子生物学 青海大学生物科学系 第一节 重组DNA技术回顾 重组DNA技术发展史上的三大里程碑： 第一，20世纪40年代，确定了遗传信息的携带者、即基因的分子 载体是DNA而不是蛋白质，解决了遗传的物质基础问题； ?1928 Frederick Griffith 1944 Oswald Avery ?Transformation of Streptococcus pneumoniae Livin Livin Heat Heat killed S cells g S g R killed S mixed with living R cells capsul cells cells cells Living S cells in blood Bacterial e sample from dead Strain mouse Injection Results 分子生物学 青海大学生物科