植物细胞和组织培养实验.PDFVIP

植物细胞和组织培养实验 Plant Cell and Tissue Culture Experiment 课程代码：L101099 学时数：40 学时 （讲课：12 学时；实验：28 学时 ） 学分数：2 执笔人：于翠梅 讨论参加人：于翠梅，郭玉华，曹萍 审核人：郭玉华 一、教学目的 通过本课程的学习，使学生能够了解国内外细胞与组织培养的最新动态和研究进展，掌握植物细胞和 组织培养的有关概念、基本原理、操作程序和关键技术，达到能独立设计各种组培工作程序、熟练进行组 培操作以及解决组培中出现的问题，为将来从事细胞遗传学、分子遗传学及分子育种工作打下一定基础。 二、教学内容、教学目标及学时分配 第一章 绪论 （1 学时） 植物组织培养的基本概念、目的及类型；植物组织培养的发展简史；植物组织培养的当前研究动向及 其应用。 第二章 实验室设备和无菌操作技术 （2 学时） 通过本章学习，使学生了解植物组织培养实验室的设计，所需仪器、设备、药品的购置、选择、清洗、 消毒及无菌操作技术等。掌握常用设备及工具的使用方法；主要的灭菌技术及无菌操作规程。树立学生的 无菌操作概念，让学生明白植物组织培养技术要求 “细心、耐心、恒心”三心合一。 1．实验室设计：通用实验室；接种室；培养室；洗涤室。 2 ．常用设备和器材：高压无菌锅；接种工具；培养设备；化学实验及分析设备；培养物细胞学观察 设备。 3 ．玻璃器皿的选择与清洗：玻璃器皿的选择；玻璃器皿的清洗 4 ．无菌操作技术：主要的灭菌技术及其应用范围；无菌操作规程。 第三章 培养基及其配制 （2 学时） 通过本章学习，使学生了解培养基的成分、种类、配制方法及常用的培养基配方及特点。理解培养基 中不同成份的作用原理。掌握植物生长调节剂的种类、作用、配制及使用要点；母液配制及保存方法；培 养基配制程序。 1．培养基的成分：无机盐；炭源和能源；维生素类；氨基酸及有机附加物；植物生长调节物质。 2 ．培养基的配制方法：水和药品的选用；母液的配制和保存；培养基配制程序。 3 ．常用培养基配方及其特点：几种常用的培养基配方；几种常用培养基的特点。 第四章 外植体的选择，接种与培养 （2 学时） 通过本章学习，使学生了解影响外植体选择的各种因素及外植体接种的一般程序。掌握常用灭菌剂种 类、外植体的灭菌及接种方法；外植体的培养方法及培养条件。 1．影响外植体选择的因素：外植体的部位：取材季节；器官的生理状态和发育年龄；外植体的大小。 2 ．外植体的灭菌与接种方法：常用灭菌剂种类；外植体的灭菌方法；接种方法；接种程序。 3 ．外植体的培养：培养方法；培养条件。 第五章 愈伤组织的培养 （2 学时） 1 通过本章学习，使学生了解愈伤组织诱导培养、继代培养和形态发生培养的过程及其影响因素。掌握 愈伤组织的形成过程及质量分类；确定继代培养时间的方法；器官发生途径和体细胞胚胎发生途径的含义 和特点。 1．愈伤组织的诱导和分化过程：愈伤组织、脱分化、再分化的概念；愈伤组织的形成过程；影响愈 伤组织的诱导的因素。 2 ．愈伤组织的继代培养：继代培养的意义；继代培养时间的确定；愈伤组织质量的分类。 3 ．愈伤组织的形态发生途径：器官发生途径；体细胞胚胎的发生途径；影响愈伤组织形态发生的因 素。 第六章 植物细胞培养 （2 学时） 通过本章学习，了解悬浮细胞培养、单细胞培养的概念及基本的培养方法；掌握悬浮细胞培养培养基 的设计及调整；分离单细胞的原理和方法以及培养单细胞的特殊条件。 1． 悬浮细胞的培养技术：悬浮细胞培养的概念；悬浮细胞培养培养基的设计及调整；续代培养与条 件培养技术。 2 ． 单细胞培养技术：单细胞培养的概念；分离单细胞的原理和方法；培养单细胞的特殊条件；培养 单细常用方法：平板培养、微室培养、看护培养。 第七章 植物组织培养中常见问题及解决办法 （1 学时） 通过本章学习，使学生了解植物组织培养过程中出现的污染、材料褐化、玻璃化现象及其症状，