Fas、Bcl2在γ射线体外诱发的急性淋巴细胞型白血病小鼠骨髓细胞中表达的研究.pdfVIP

……4。．1．夸夸姿赛践蝗生物样品预处理中，遇到了一些实际问题，也积累了不少实践经验。譬如，在稻米 跫耋垡垄华磐堡妻，鉴娶颦誊经枣化后，膨化现象严重，炭化后的体积不像其它样品那样会蓟、许多岌斋 曼堡考警大了许多。又因灰化炉空间有限，每次只能处理很少样品，所以整个处理过穗。薪磊爵商遗釜买莩 介质名称 灰化温度(℃) 灰化时两弋币■——■页藓瓦弋i西广 ————_；鬲——百■——————————————————‘—o—二二_二一—————————：=∑=：型：：曼： 稻米450 1 l；丁—————1蕊—一 注：灰化时间和灰鲜比是同种样品的平均值 4．2本次实验所用的青菜、白菜、芥菜的灰鲜比都比其他资料列举的平均值要高，可能与处理时正值 高温季节有关，如青菜洗净后在夜间晾晒过程中有脱水现象。而其中芥菜的灰鲜比最高，除上述原因外， 此种菜本身质地较致密，含水量少也是原因之一。 4．3大量生物样品的灰化主要靠干式灰化。我们的体会是，灰化时应严格控制温度，炭化后进灰化炉 的可较快地升温至预定温度，并在该温度下灰化几十小时，使样品成为含炭量最少的灰，要严格防止马 福炉内温度过高，造成样品损失或烧结。对灰化时容易挥发的核素，如：铯、碘、钌等，应视其理化性 质确定其具体灰化温度或灰化前加入适当化学试剂加以保护。 FasxBel．2在Y射线体外诱发的急性淋巴细胞型白血病 小鼠骨髓细胞中表达的研究 李百龙蔡建明黄定德黄越承赵芳高福孙顶陈杞 第二军医大学海军医学系放射医学教研室上海200433 【摘要1目的：观察Fas、Bel．2在Y射线体外诱发的急性淋巴细胞型白血病小鼠骨髓细胞中表达情况， y射线全身照射BALB／c小鼠诱发白血病模型，通过流式 探讨辐射致癌的机制。方法；采用4次1．750y 细胞仪对癌变组、未癌变组及对照组小鼠骨髓细胞中Fas、Bcl-2的表达进行检测：应用抗Fas抗体诱导 细胞凋亡，进一步观察Fas、Bcl．2的表达对骨髓细胞凋亡的影响。结果：癌变组小鼠骨髓细胞较未癌变 组及对照组，Fas表达明显下降，而Bcl．2的表达明显增强：癌变组小鼠骨髓细胞明显耐受抗Fas抗体诱 导的细胞凋亡。结论：Fas低表达、Bcl．2高表达，导致了细胞凋亡受到抑制，可能是辐射引起小鼠急性 淋巴细胞型白血病的机制之一。 关键词：辐射致癌；Fas；Bel一2；细胞凋亡 ．．皇离辐射作为环境因素能够诱发肿瘤，其机制的研究越来越受到重视。近年来研究表明肿瘤的发生 至墨与细胞的异常增殖和分化有关，也与细胞凋亡异常有关。Fas、Bcl．2基因是凋亡相关基因中作用相 反的两个典型代表，在细胞凋亡中发挥着重要的作用【l’羽，但是Fas、Bcl．2在辐射致癌中如何表达，占蔷 还不十分清楚。因此我们利用Y射线体外诱发BALB／c小鼠急性淋巴细胞型白血病的动物模型，观察FaS、 Bcl·2在急性淋巴细胞型白血病小鼠骨髓细胞的表达情况，以进一步从细胞凋亡的角度研究辐射致癌的分 子机制。 I、材料和方法 1．1辐射致小鼠急性淋巴细胞型白血病模型，采用本实验室自制的“辐射致小鼠急性淋巴细胞型 白血病模型”，在本期中另有文献p1报道。 1．2动物分组：在照射组中分为癌变组(病理学检查证实为淋巴细胞型白血病)和未癌变组(病理学 检查未发现肿瘤者)。对照组为正常BALB／c小鼠，未经Y射线照射，与照射组同步喂养。 骨，用PBS冲出骨髓，过4号针头，制成单细胞悬液，经淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，调适量浓 度备用。 ． X 1．4流式细胞仪检测Fas、Bcl一2的表达：Fas检测：每分样品取细胞悬液100ul(1 106个细胞／m1)， PE标记Anti·mouseCD95(美国BD公司)直标法染色，4℃反应45 rain，以PE标记非特异抗小鼠IgG作 细胞悬液，2％的多聚甲醛固定20分钟后，FITC标记Anti．mouse 染色，