2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体(最新整合版).ppt

【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ） A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ ） 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是（ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因 1、每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体，不同种类的B淋巴细胞分泌的抗体不同 2、B淋巴细胞在体外培养时不能无限增值，骨髓瘤细胞能够无限增值 3.单克隆制备过程中用到的生物技术手段 动物细胞融合 动物细胞培养 【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞 【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ 　） B淋巴细胞 　 B．T淋巴细胞 C．骨髓瘤细胞 D．杂交瘤细胞 【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ） A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 （3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种： ①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是 。 （4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的_______细胞制备的，其化学本质是___________，应用于人体，会作为 产生 ，解决这个问题的方法是_____________________________。 大量生产选①，小规模生产选② 效应B 蛋白质 异物 免疫反应 采用人的效应B细胞制备 * * * 2.2.2.动物细胞融合与单克隆抗体 一、动物细胞融合： 2、原理： 细胞膜具有一定的流动性 1、概念：《选修3》P.52 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后的单核细胞称杂交细胞。 诱导方式 物理法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒（特有的方法） 3、诱导方法： 离心、电激、振动 聚乙二醇 利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。 灭活的病毒对细胞没有感染能力,并不破坏这些病原体的抗原结构。 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 5、过程（以灭活病毒诱导动物细胞融合为例） 灭活的病毒 融合 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 不同DNA的两个细胞 细胞完成融合的标志： 细胞核融合为一个核 7、动物细胞融合的应用： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 制备单克隆抗体（重要应用） 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 6、动物细胞融合的意义： 获得杂种细胞、制备 单克隆抗 体 除应用植物 细胞杂交手 段外，还有 灭活病毒 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 细胞膜的 流动性 动物细 胞融合 克服远源 杂交不亲 和，获得 杂种植株 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 细胞膜的 流动性 植物体 细胞杂交 用途 诱导手段 细胞融合的方法 细胞融合的原理 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 B B A 强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞 抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。 二、单克隆抗体 B淋巴细胞 效应B淋巴细胞 记忆B淋巴细胞 分化 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 单克隆抗体！ 读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆