高考生物疑难例析之“现代生物技术”概论.ppt

“现代生物技术” 疑难例析 高级教师 郑仲贤 现代生物技术？ 目的 原理 操作 基因工程 植物组织培养 动物细胞培养 细胞融合 PCR 分子杂交 电泳 定向改变生物性状 植物细胞→植物体 少量细胞→大量细胞 不同细胞融合成为一个细胞 获得大量的DNA分子 找到碱基序列相同的核酸 分离DNA、蛋白质分子 中心法则 细胞全能性 细胞有丝分裂 生物膜的流动性 DNA分子的复制 碱基互补配对 扩散速度： 带电量、大小 空间结构 一、基因工程 获取 构建 **. 导入 筛选 **. 表达与检测 **. 例1.已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图 中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切 断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述 线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切 断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生 长度不同的DNA片段种类数是（ ） A．3种 B．4种 C．9种 D．12种 C 例2.科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行 重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。已知限制酶I 的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶II的识别 序列和切点是—↓GATC—，据图回答： 据图分析，在构建基因表达载体过程中，应选用限制酶 切割质粒，经切割后，质粒上形成的黏性末端是： 用限制酶 切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后 形成的黏性末端可以通过 原则进行连接。 碱基互补配对 Ⅰ Ⅱ —G GATCC— —CCTAG G— 限制酶I：—G↓GATCC— 限制酶II：—↓GATC— 例3．图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基 序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。有MspI、BamHI、 MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切 位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。 若将图2中质粒 和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那 应选用的限制酶是 。在导入重组质粒后，为筛选出含 重组质粒的大肠杆菌，一般需用添加 的培养基进行培养。 经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确 表达，其最可能的原因是？ 同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向链接 BamH I 抗生素B 例4．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭 头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： （1）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热 稳定性越 。 （2）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割， 原因是______________________________________________。 （3）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶 同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止： 高 质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 2．将重组DNA导入受体细胞 例5．将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内的正确方法是 ， 原因是： A．将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养 B．用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口 愈伤组织获得重组质粒后经过植物组织培养能够得到每个体细胞均含目的基因的个体，通过有性繁殖将目的基因传给子代。 而B仅仅在该叶片内部分细胞中能合成丙蛋白，其他部位的细胞不含目的基因,不能通过有性繁殖将目的基因传给子代。 A 3. 受体细胞的筛选——选择培养 例6．为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重