FIAQCM监测纳米金原位生长及其在肝素与抗凝血酶Ⅲ相互作用体系中的应用.pdfVIP

B33 FIA．QCM监测纳米金原位生长及其在肝素与抗凝血酶 III相互作用体系中的应用 章群丹罗佳陈义刘国诠赵睿* zhaorui@iccas．acm 中国科学院化学研究所生命分析化学实验室北京100080 近年来，传感器表面修饰纳米粒子已成为提高传感响应的重要方法之一。其中，纳米金 以其制备方法简单，且具有独特的物理化学性质而应用最广。纳米金的合成有许多种方法， 其中最简便、最常用的方法是柠檬酸三钠还原法，采用不同比例的氯金酸和柠檬酸三钠混合 溶液可得到不同粒径的纳米金，以此方法合成小粒径纳米金，单分散性较好．粒径也较均～； 但合成大尺寸纳米金颗粒时，则单分散性较差。Natan等以所合成的小颗粒纳米金做种子，在 羟胺溶液中进行生长，得到了粒径均一的大颗粒纳米金“】。 石英晶体微天平(QCM)是一种极其灵敏的表面质量型传感器，在生物分子相互作用的 研究中得到了快速的发展，例如液相中DNA杂交、压电免疫分析、蛋白与蛋白、蛋白与小分 子药物相互作用、分子印记技术等等∞1。为了提高检测灵敏度，人们尝试在QCM表面修饰上 纳米金颗粒后再偶联配基，以增加比表面积，进而提高传感响应值。 图I压电石英片上纳米金生长时间与颓率之阃的关幕田 图2纳米垒在压电石英片上原位生长前后的sEM圈 74 本研究探讨了纳米金颗粒在QCM表面的原位生长，以QCM传感谱和SEM监测纳米金 颗粒的生长状况，并采用肝素与抗凝血酶IT[(ATIU)相互作用体系，考察了纳米金不同生长 时期(粒径大小)对传感响应的影响。图1为压电石英晶片上纳米金生长时间与频率之间的关系。 原位生长的最初20分钟，频率急剧下降，表明金颗粒急剧增大：20分钟以后，颗粒增长幅度 减小。纳米金颗粒生长前后的sEM图(图2)表明，采用原位生长的方式，可得到颗粒大且 粒径较均一的纳米金颗粒。在不同粒径(不同生长时间)的纳米金颗粒表面固定肝素后．考 察了与ATIll相互作用的情况(图3)，并将纳米金生长时间与传感响应频降值做图(图4)。 结果表明，金纳米粒子的大小对传感相应有一定的影响，当金纳米颗粒较小时，原位增长有 利于增加表面积，使配基固定数量增加，进而引起传感响应值提高：而金纳米颗粒增长到一 定尺寸后，颗粒之间紧密接触而堆积成更大的粒子，表面积反而下降，加之配基固定的位阻 效应，使得传感响应值不升反降。 140 120 i00 兰80 捌 世60 氍 蚰 20 0 0 5 lO 15 20 25 时间(_in) 圈3妯米盘不同生长时同所脊到的藏相传癣响应谱图 图4纳米盘生长时间与传雇响应囊阵值关秉 1、2、3、4分别为叠颗粒生长3、5、10、20分钟后接 肝素进行液相检测ATm得到的谱图。 ●考文■： 【1】K．免Brow玑M．J．Natan，Langmuir1998，14：726_728 [21K．A．Ma,rx，Bh出啪md髓m髑．2003．4(s)：1099‘1120 a1．Biosens．Bioelectmn一，2005，21：121