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农残提取物中的干扰杂质净化问题(净化秘籍)
专业:生物技术
班级:1402班
学号:201478010225
姓名:袁铭
前言
农残检测分析中样本提取以后,得到的提取物除农药分子本身之外还有许多一起提取出来的物质如:脂质、蜡质、植物色素、有机酸等。如果不除去这些辅提取物,将会严重干扰检测如:
影响分析柱柱效
造成错误结果(污染)
污染进样系统
加强或减弱GC的响应(基质效应)
等等,所以为了有效减少错误分析结果和损坏仪器,需要对提取液进行净化。
第一式——植物色素的净化秘籍
植物色素类(Phytochromes)主要有脂溶往色素与水溶性色素两类。
脂溶性色素主要为叶绿素、叶黄素与胡萝卜素;水溶性色素主要为花色甙类,又称花青素,普遍存在于花中。
常见的色素净化方法:
凝胶色谱(GPC)法
SPE净化
GPC法
分离原理: 基于体积排阻,按照化合物的分子量不同从大到小顺序出峰。
应用:对大分子油脂和色素的样品净化十分有效并易于实现自动化操作。
缺陷:仪器成本高,溶剂用量大
SPE净化法
除此之外还有 硅胶 凝胶 活性炭 等等材质作为吸附剂填充物
SPE净化法
步骤图示举例:
SPE净化法
步骤图示举例:
第二式——有机酸的净化秘籍
常用—等电点沉淀法
提取液中有机酸通常为氨基酸,多肽,蛋白质等物质,大多为两性物质,调节溶液的PH,以达到某一物质的等电点,该物质的溶解度降到最低,从而沉淀析出。为了达到充分沉淀,等电点往往与盐析法或有机溶剂沉淀法并用。
第三式——脂质和蜡质的净化秘籍
常见的方法:
磺化法
原理:浓硫酸与脂质、蜡质等起磺化反应,生成极性很大的物质,而与农药分离。
适用于不被浓硫酸分解的农药;
不适用于有机磷、氨基甲酸酯类农药。
其他方法举例
液液分配法:利用待测农药与杂质在两种互不相容
的溶剂中溶解度的不同将两者分离开来。
盐析法:常作盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等
有机溶剂沉淀法:一般用乙醇和丙酮,甲醇,丙酮最好,甲醇最次。
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