复旦大学分析化学AII第十一章毛细管电泳概要.ppt

第22章 毛细管电泳 capillary electrophoresis 1. 概述（generalization） (1)、经典电泳分析 traditional electrophoresis (2)、高效毛细管电泳分析 high performance capillary electrophoresis 2.高效毛细管电泳(HPCE)基本原理 (2).电渗现象与电渗流 b.HPCE中电渗流的大小 c. HPCE中电渗流的方向 d.HPCE中电渗流的流形 e. HPCE中电渗流的作用 f、分离过程 3. HPCE中影响电渗流的因素(Zeta电位和粘度) factors influenced electroosmosis (3). 电解质溶液性质的影响 (4). 温度的影响 (5).添加剂的影响 4.HPCE中的参数与关系式 (3).分离度 5.影响分离效率的因素—区带展宽 factors influenced the efficiency—band broadening (3).焦耳热与温度梯度的影响 (4).溶质与管壁间的相互作用 (5).其他影响因素 6.仪器流程与主要部件 process and main assembly (1).高压电源 毛细管结构 (3).缓冲液池 7.分离类型 (1).毛细管区带电泳capillary zone electrophoresis ，CZE (2).毛细管凝胶电泳 capillary gel electrophoresis ，CGE (3).胶束电动毛细管色谱（MECC ，MEKC）micellar electrokinetic capillary chromatography，MEKC (4).毛细管等电聚焦 capillary isoelectric focusing，CIEF (5).毛细管等速电泳 capillary isotachophoresis ，CITP capillary isotachophoresis ，CITP (6).毛细管电渗色谱 capillary electroosmostic chromatography ，CEC (1)、离子分析 analysis of ion 阴离子分析 (2).药物分析 analysis of pharmaceutics (3).手性化合物分析 analysis of chiral compounds (4).氨基酸与蛋白质分析 analysis of amino acids 蛋白质分析 (5).核酸分析及DNA排序 analysis of nucleic acids and sequence of DNA 9.新进展advances and special topics 作业-P553: 22-2; 22-3; 22-5; 22-6; 22-9; 22-12; 化学惰性，机械稳定性好； (4). 检测器 要求：具有极高灵敏度，可柱端检测； 检测器、数据采集与计算机数据处理一体化； 类型 检测限/mol 特点 紫外-可见 10-13～10-15 加二极管阵列，光谱信息 荧光 10-15～10-17 灵敏度高，样品需衍生 激光诱导荧光 10-18～10-20 灵敏度极高，样品需衍生 电导 10-18～10-19 离子灵敏，需专用的装置； 八种分离类型，介绍常用的几种； 根据试样性质不同，采用不同的分离类型； 每种机理的选择性不同； 带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和。 正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出； 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流出； 阴离子：两种效应的运动方向相反；ν电渗流 ν电泳时,阴离子在负极最后流出,在这种情况下,不但可以按类分离,同种类离子由于差速迁移被相互分离。 最基本、应用广的分离模式； 将聚丙烯酰胺等在毛细管柱内交联生成凝胶。 其具有多孔性，类似分子筛的作用，试样分子按大小分离。能够有效减小组分扩散，所得峰型尖锐，分离效率高。 蛋白质、DNA等的电荷/质量比与分子大小无关，CZE模式很难分离，采用CGE能获得良好分离，DAN排序的重要手段。 特点：抗对流性好，散热性好，分离度极高。 无胶筛分技术：采用低粘度的线性聚合物溶液代替高粘度交联聚丙烯酰胺。柱便宜、易制备。 1.缓冲溶液中加入离子型表面活性