凝胶渗透层析仪(GPC).doc

凝膠滲透層析儀 (GPC) GPC的工作原理是利用固體粒子在流體內的擴散行為作為分離的基礎，具有良好解析能力(High resolution)與高理論板數的分離管是構成GPC良好分析能力(High performance)的要件。GPC的分離管為Polystyrene和divinylbenzene共聚物膠體所填充而成，GPC則是利用它們的「Effective size」來分離溶液中的分子。將溶解後的待測物注入流動相(mobile phase)，在流動相的推動下，待測物流經緊密填充在層析管柱裡數以百萬計的大小孔洞，其中小分子的單元由於在孔洞內「旅行」較長的時間，因此較大分子的單元更晚流出層析管，由於這種時間差的產生，便形成分離的效果。層析管內部的斷面示意圖如下所示(圖3-1) 圖3-1 GPC層析管截面示意圖 GPC其定量方法是利用多種已知絕對分子量的聚苯乙烯標準品，由分子量取對數與時間作圖，經由三次方程式曲線的比對得到在該範圍內之校正曲線方程式： log(Mw) = D0 + D1(RT) + D2(RT)2 + D3(RT)3 RT：retention time 在已知待測物沖提時間的情形下，便可根據上式計算出其分子量。表為各種GPC分離管的試用範圍，可以利用(表3-1)選用最試用的GPC分離管。若待測物不是線型聚苯乙烯， 則必須乘上特定的因子(factor)，才會接近實際的分子量。層析管的配置由大至小依序串聯，以避免壓力分佈不均。移動相(Mobile phase)為THF，幫浦之流速為1.0 ml/min。 表3-1 各種GPC分離管的試用範圍 Ultrastyragel THF Columns Effective molecular weight range 100 (THF) oA 50~1500 500 (THF) oA 100~10000 103 (THF) oA 200~30000 104 (THF) oA 5000~600000 105 (THF) oA 50000~4000000 106 (THF) oA 200000 資料來源: .tw/ETD-db/ETD-search/getfile?URN=etd-1102105-145413filename=etd-1102105-145413.pdf 黏度法: 黏度為流體的基本物理性質，可視為流體分子內間的摩擦所造成的阻力。若溶液中粒子為同一大小的球體，其黏度可以以下式表示： 若ηo為純溶劑黏度，(η/ηo)為相對黏度ηr，而(η/ηo)-1稱為比黏度，ηsp。定義固有黏度[η]??(intrinsic viscosity)?為 C (ηo =1) 2. 高分子基本特性 簡單來說，就是分子量很高的分子，分子量約10000以上，較嚴謹的定義為：有很多化學單元，以鍵結而成的高分子的分子，與低分子量較不同的地方有： (1). 分子量很高，使得凡德瓦力和大於分子本身的化學鍵，故加熱氣化前，分子已分解，故沒有沸點的存在，亦無氣體的高分子。 (2). 高分子之分子量常見多分佈性，因高分子由多化學單元聚合而成，不同的化學單元使高分子所呈現的物性不同。 依測定方法，分子量Mw，黏度平均分子量Mv及Mz之平均分子量， for PVOH，a=0.76 ；Mv = 1.89 Mw (3). 由於分子鏈很長，很難完全形成晶體，又因有分子量分佈，使物性更加複雜，也因此合成後的物性呈多樣化，使應用廣泛。 3. Mark-Houwink關係式 對於線性高分子，其主鏈上的碳單鍵可以旋轉，假若鏈上的碳原子的組態各自獨立，可知高分子任何分離的兩鏈節（chain segment），在空間上的方向就不會互相關聯，那麼這條分子就像一團鬆垮交纏的繩索。透過簡單的計算，發現兩末端平均距離d，相當於把分子看成捲屈球體，其半徑與鏈長的平方跟成正比，又鏈長相當於分子量（因鏈加長，分子量增加）d M，所以每一分子所佔有的體積Vm與M’呈正比。 而在濃度C（g/100cc）的高分子稀薄溶液中，相當於給定CV重量的高分子，其分子數目與分子量成反比，所以高分子球體在溶液佔有全部的體積為 V （CV/M）．M2/3＝CVM1/2 則 [η]?＝? 事實上，尚須考慮聚外容積(excluded volume)Mark與Houwink提出 [η]?＝?a ；M為v K與a均為常數，與溶劑、溶質、溫度有關。Flory 在25℃下測PVOH溶於水，得 [η]?＝? 須注意的事[η]