植物组织培养技术绪论讲义-do.doc

绪论 引言：植物组织培养是世纪初开始，以植物生理学为基础在植物细胞全能性totipotency )理论的指导下，特别是植物生长调节剂(growth regulator)的应用发展起多年的辛勤探索，现在可以说几乎所有的植物，其 近0多年来，植物组织培养成为生物学科 植物组织培养的概念和种类 1.1 植物组织培养的概念 植物组织培养的概念有广义和狭义之分。广义的植物组织培养（plant tissue culture ）离体离体培养植物组织培养概念中所提到的无菌(aepsis)是指使培养器皿、器械、培养基和培养材料等植物组织培养中，使用的各种器官、组(explant)。在植物组织培养中，由于培养的植物材料已(plant culture in vitro)。(in vitro ecology)，其构成是培养基、植物材料和人工环境条件。如分生组织、表皮组织、薄壁组织等callus）进行离体培养的技术。愈伤组织是指外植体因受伤或在离体培养时，其未分化的细5种类型，即愈伤组织培养、悬浮细胞培养、 器官培养(胚、花药、子房、根和茎的培养等)、茎尖分生组织培养和原生质体培养。但发展至今，其范围日益扩大，已包括植物体和它高度组织化的离体器官、组织、复杂的多细胞和原生质体的离体无菌培养。因此，从培养对象上来看，可将其分成以下几种： 1.2.1植株的培养（culture of plant） 植株的培养是指将幼苗及较大植物体放在无菌的人工环境中让其生长发育的方法。植株培养一般是作为植物组织培养的中间环节，如再生植株的继代培养、壮苗培养等；也用于植物的种质保存，如某些名、优、新或濒危植物的体外慢生长保存。 1.2.2 胚胎培养（embryo culture） 植物胚胎的培养是指将植物成熟或未成熟胚放在离体的、无菌的人工环境中让其生长发育的方法。由于植物的胚是包含在胚珠和子房里，因而进行胚胎培养时，常常是取胚珠和子房放在培养基上，使其内的胚进一步生长发育。胚胎培养的方法也可用于离体受精后形成的杂种胚培养和体细胞诱导出的胚状体培养。 1.2.3 器官培养（organ culture ） 植物的器官有两类：营养器官和生殖器官。根、茎、叶是植物的三大营养器官，花、种子、果实是植物的生殖器官。植物器官的培养指的是以植物的根、茎、叶、花、种子、果实等器官的组织切块（切块既可是部分器官，也可是部分组织）为外植体，使之在离体的人工无菌环境中进行生长发育的方法。植物器官培养强调的是外植体的器官类别，培养时可用整体器官，也可用器官切块或切段。不同植物的同一器官有不同的培养结果，同一植株的不同器官也有不同的培养结果。这一点在应用植物组织培养技术时相当重要。 1.2.4 组织培养（tissue culture） 植物组织的培养是指将植物体的组织（愈伤组织、分生组织、形成层组织、韧皮韧皮部组织等）或组织切块，放在离体的无菌环境中让其生长发育的方法。由于离体培养的组织块大多是先脱分化形成愈伤组织，而后再进一步生长分化，因此也将植物组织的培养定义为愈伤组织的培养。 1.2.5 细胞培养（cell culture） 植物细胞的培养是指将植物材料从母体植株上切取后，分离成细胞或小细胞团，放在无菌的人工环境条件下使其生长发育的方法。植物细胞培养强调的培养对象是游离细胞或细胞团，培养时可用一群细胞，也可用单个细胞。 1.2.6 原生质体培养（protoplast culture） 植物原生质体的培养是指将植物的细胞去除细胞壁后形成裸露的原生质体，把原生质体放在无菌的人工环境条件下使其生长发育的方法。 其中愈伤组织培养是一种最常见的培养形式。愈伤组织培养之所以是一种最常见的培养形式，是因为除茎尖分生组织培养和一部分器官培养以外，其他几种培养形式最终也都要经历愈伤组织才能产生再生植株。此外，愈伤组织还常常是悬浮培养的细胞和原生质体的来源。 根据培养过程，将从植物体上分离下来的部分进行第一次培养，称为初代培养（primary culture ）植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞。(如进行营养缺陷型突变细胞的筛选)外，培养基中包含了植物生长(phytohormone)，培养基的pH和(如小孢子)和三倍体细胞(如胚乳)水平上，即使是去掉了细胞壁的细胞(原生质体)，(clone，也称无性繁殖系)，或通过改变培养基成分，特别是其中的植物激素的种类和配比，而100％， 3. 植物组织培养有关的基本概念与基础理论 3.1植物细胞全能性 植物细胞全能性（totipotency）是植物组织培养的理论基础。大家知道，植物细胞和动物细胞在结构上有若干区别，同样地，它们在生理特性上也不完全一样。动物细胞的分化一般都是不可逆的