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一种参比检测的SPR生化分析系统 王垩亟匕蔡浩原，崔大付+，王子杰，郑自攀，李亚亭 (中国科学院电子学研究所传感技术国家重点实验室北京100080) 一台SPR生化传感器以来，有关SPR生化分析的研究成为国际上生化分析领域的热点。 产品各具特色，这些仪器渐渐成为生命科学、分子电子学、环境科学、食品检测、疾病 诊断、药物筛选、基因工程等许多领域研究和生产中的强有力工具“。】。 为消除表面等离子体谐振(SPR)技术进行生化分析时溶液本体折射率、温度、激光 光功率稳定性以及生物敏感膜一致性等影响，本文提出一种带参比检测的SPR新方法， 并在原来SPR2000生化分析系统角度扫描的基础上，研制出单通道双参数SPR生化分析 系统，实现了SPR的参比检测。本文所研制的新型SPR生化分析系统，除具备SPR生化 分析的所有特点以外，还能在给出检测样品结果的同时提供一个惰性参比测试结果，这 一测试结果作为样品测试结果的参比值，与样品测量值进行比对差分，可消除上述因素 的影响，进一步提高了仪器的灵敏度、可靠性和准确性。 图1所示为参比SPR生化分析系统的结构框图，由机械扫描系统、光学系统、流通 系统、生物芯片和软件组成。 机械扫描系统由对称结构的菱形机构和丝杠螺母组成的传动机构构成口】。在菱形机构 的左右两对称臂上分别安装光学系统的激光光源和二象限光电接收器，在两臂的连接点 上放置棱镜，生物芯片通过光学耦舍液和棱镜一起组成’Kretschrnan棱镜耦合SPR系 统；开式流通池的一侧和芯片一起组成微测量池，通过流通系统的蠕动泵和六通阀完成 样品的SPR流动生化分析；计算机软件控制机械扫描系统的丝杠转动，通过螺母带动菱 形机构的双臂绕棱镜对称的转动，从而实现激光光源和光电接收器产生对称的运动，实 现SPR角度扫描的整个过程。 计算机软件除了控制系统运动之外，还可以同时采集光电接收器的SPR响应信号和 SPR扫描角度信息，在每一个可分辨的入射角度，系统均可对光强进行采集，使得检测 的采样率和样本数可控。将激光光源的入射角固定在SPR谐振角的附近，可通过定点监 测光强的方法实现对样品的SPR特性分析9j。 本系统中采用了一定面积的平行激光作为系统的激发光源，采用两象限阵列光电池 作为SPR信号接收器。 为实现SPR的参比检测以提高SPR系统的分析精度，本系统专门设计和制作了参比 SPR生物芯片。该芯片采用MEMS工艺获得纳米金膜作为生物芯片的衬底，通过生物材 料自组装的方法和特殊的生化工艺处理，获得了参比的SPR生物芯片，芯片的一侧具有 BIAcoreCM5芯片性质的葡聚糖生物敏感膜，用于固定生物材料：另一侧的生物膜则对待 +通讯联系人：王军波E--mail：jbwang@mail．ie．ac．cn 国家自然科学基金资助项目(NoNoNo 328 测生物材料呈现惰性，仅对溶液本体折射率敏感。 本文采用MEMS技术．设计和制作了单通道测量池，通道跨过生物芯片的两个不同 性质的生物膜，当待测样品溶液流过通道时，可实现SPR的参比检测，即一个测试信号 仅为溶液本体折射率的变化，另一个测试信号还包含样品的分析结果。通过差分的方法 可以减小溶液本体折射率、激光光功率、温度等因素的影响。图2为采用参比SPR生化 分析系统监测IgG和抗IgG结合的SPR光强响应曲线，图中红线为参比曲线．蓝线为测 试曲线。由图中可知，采用这种参比检测的方法和系统．为样品的现场快速检测奠定了 基础。本文所提出的参比SPR检测方法和系统，已成功的应用于SARS、磺胺类兽药残 留等的分析检测。 激光光源V冬文2三?鬈学电接收器 拦星：甜 ；t-甄一芯片 1780 §1730 蔡1680 1630} ●＼—————————————————一～——√’一 1580 一——…～…一一 1 121241361481601721