脂质分析.ppt

* 油脂萃取 * 索氏萃取法 計算 或 粗脂肪%=?(抽提後濾紙與樣品重量-抽提前濾紙重量/樣品重量) × 100 濾紙筒應事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。 * 油脂萃取 * 注意事項和說明 抽提 ?????? 將裝好樣的紙筒放入抽提管 ， 倒入乙醚，乙醚的量從提取管加入，加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置，在恒溫水浴中抽提，水浴溫度大約為55℃左右，可用濾紙檢驗，理論值抽提6-8小時，實際值3-4小時，但也根據樣品性質來決定。 （1）樣品應乾燥後研細，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，不能往外漏樣品，否則重做。 （2）放入濾紙筒的高度不能超過回流彎管，否則乙醚不易穿透樣品，使脂肪不能全部提出，造成誤差。 （3）?????? 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理，等其乾燥後連同濾紙一起放入提取器內。 * 油脂萃取 * （4）提取時水浴溫度不能過高，一般使乙醚剛開始沸騰即可（約45℃左右），回流速度以8-12次/時為宜。 （5） 所用乙醚必需是無水乙醚，如含有水分則可能將樣品中的糖以及無機物抽出，造成誤差。 （6）若用乾樣品測定脂肪，可按下式計算原來樣品脂肪的含量 脂肪（%）= （W1-W2）(100-A) / W A— 100克樣品中水分的含量（g） (7)? 冷凝管上端最好連接一個氯化鈣乾燥管，這樣不僅可以防止空氣中水分進入，而且還可以避免乙醚揮發在空氣中。這樣可防止實驗室微小環境空氣的污染，如無此裝置，塞一團幹脫脂棉球亦可。 油脂萃取 油脂萃取 * 油脂萃取 * 脂質分析 油脂抽出 * 油脂萃取 * 提取劑的選擇及樣品預處理 食品中脂肪的存在形式有游離態的，也有結合態的。 游離態的脂一般為儲存的脂肪，如動物性脂肪和植物性脂肪。 結合態的脂如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白等中的脂肪與蛋白質或碳水化合物等成分形成的結合態。 對大多數食品來說，游離態的脂肪是主要的，結合態的脂肪含量較少。 一、? 提取劑的選擇 脂類的結構比較複雜，到現在沒有一種溶劑能將純脂肪萃取出來，也就是說提取出來的都是粗脂肪。（大部分是脂肪，還有一些其他成分）。 前面講性質時講到，脂類不溶于水，易溶於有機溶劑。測定脂類大多採用低沸點的有機溶劑。常用的溶劑有乙醚、石油醚、氯仿—甲醇混合溶劑。 其中乙醚溶解脂肪的能力強，應用最廣泛。 * 油脂萃取 * 提取劑的選擇及樣品預處理 (一)乙醚 (二)石油醚 (三)氯仿-甲醇 (氯仿可用正己烷代替) * 油脂萃取 * 乙醚 Diethyl ether (C2H5)2O 下面我們講他們的特點： （一）? 乙醚（非極性）的優缺點 1、?優點 （1）乙醚的沸點低為34.6℃ （2）溶劑脂肪能力強大於石油醚 2、?? 缺點 （1）能被2%的水飽和 （2）含水的乙醚抽提能力降低（氧與水能形成氫鍵使穿透組織能力降低，即抽提能力下降） （3）含水的乙醇是非脂成分溶解，而被抽提出來，使結果偏高（糖蛋白質等） （4）乙醚易燃。 乙醚 Diethyl ether (C2H5)2O * 油脂萃取 * * 油脂萃取 * 乙醚 提取卵磷脂 25℃ mg / 100g 低分子成分 無水乙醚 含水乙醚 葡萄糖 10.5mg/100g 315mg/100g 蔗糖 15mg/100g 150mg/100g 絲氨酸 0 15mg/100g NaCl 0 25mg/100g 由此可見，乙醚含水後，能將樣品中非脂成分溶解增加結果的重量，因此，使用乙醚時，樣品不能含水分，必須乾燥。 * 油脂萃取 * 石油醚 （二、）石油醚 石油醚溶解脂肪的能力比乙醚弱些，但吸收水分比乙醚少。沒有乙醚易燃。使用時允許樣品含有微量水分，它沒有膠溶現象，不會夾帶膠溶澱粉、蛋白質等物質。採用石油醚提取劑，測定值比較接近真實值。 對於乙醚、石油醚這兩種溶劑適用於已烘乾磨碎樣品，不易潮解結塊的樣品，而且只能提取樣品種中游離態的脂肪，不能提取結合態的脂肪，對於結合態脂，必須預先用酸或堿破壞脂類和非脂成分的結合後才能提取。有時利用兩種溶劑的優點，常常混合使用。 Petroleum ether 主要成分： 戊烷、己烷。pentane, hexane, and heptane (5-7 C) 沸點(℃)：30-90 * 油脂萃取 * * 油脂萃取 * 氯仿-甲醇 （三）氯仿-甲醇 ????? 氯仿-甲醇是另一種有效的溶劑，它對於脂蛋白，磷脂的提取效率較高，特別適用於水產品、家禽、蛋製品等食品脂肪的提取。(正己烷已取代氯仿) * 油脂萃取 * 二、樣品的預處理 樣品的預處理方法決定於樣品本身的性質，牛乳預處理非常簡單，而植物和動物組織的處理方法較為複雜。 1、 粉碎： 粉碎的方法很多，不論是切碎、碾磨、絞碎或者採用均質等處理方法，應當使樣品中脂類物理、化學以及酶的降