丹参注射液对慢性胰腺炎的治疗作用.pdf

山西医科大学 硕士学位论文 丹参注射液对慢性胰腺炎的治疗作用 姓名：张洪宇 申请学位级别：硕士 专业：普外科学 指导教师：赵浩亮 2011-03-10 山西医科大学硕士学位论文 丹参注射液对慢性胰腺炎的治疗作用 摘 要 目的 慢性胰腺炎 （CP ）是由于胰腺实质的反复性或持续性炎症导致的胰腺实质 和胰管进行性 的不可逆的损害和纤维化，主要症状有腹痛，消瘦，糖尿 ，黄疸及脂肪 泻，并表现出不同程度的胰腺内外分泌功能减退或丧失。慢性胰腺炎的形态学特征是 胰腺组织的进行性纤维化，典型的病理改变是胰腺组织缩小，呈不规则结节样变硬， 常伴有胰腺组织钙化、或有腺泡萎缩，胰腺导管节段性扩张，其 内可有结石及假性囊 肿形成，伴有胰岛细胞 的减少或萎缩。其病理生理过程较为复杂，主要是由于胰腺组 织中以胶原为主的细胞外基质 (ECM)合成与沉淀增加，降解减少，两者失去动态平衡 所致 。本实验是通过测量层粘连蛋白（LN）和透明质酸（HA），从而验证丹参对慢性胰腺 炎的治疗作用以及不同剂量组的丹参注射液对慢性胰腺炎的治疗效果 。本实验采用光 度酶联免疫分析法（ELISA）检测SD大鼠胰腺正常组、慢性胰腺炎对照组、丹参注射液干 预小剂量组、丹参注射液干预中剂量组、丹参注射液干预大剂量组中的LN及HA含量，进行 比较分析，并观察大鼠慢性胰腺炎胰腺组织的病理学变化，以初步探讨丹参注射液对慢性 胰腺炎胰腺纤维化的治疗作用。 方法 SD大鼠随机方法等分成5组，每组10只，分别为正常组、模型正常组、低剂量丹 参干预组（400mg/kg）、中剂量丹参干预组（800mg/kg）、大剂量丹参干预组（1600mg/kg）。 除正常组外，其余4组大鼠术前禁食不进水12h,胺碘酮（100 mg/kg体重）腹腔注射麻醉， 1/2 大鼠固定后常规消毒，沿腹白线做正中切口，4 号静脉头皮针穿刺胆胰管后，夹闭胰胆管 近肝门端，通过恒流泵向十二指肠乳头注射2%三硝基苯磺酸（TNBS）乙醇磷酸盐缓冲液 0.4ml，1h注完，关闭恒流泵后维持压力10min,以防药物回流，逐层关闭腹腔，手术过程 严格无菌操作。为防止大鼠脱水，每天皮下注射生理盐水3次，每次5ml,直至大鼠能自由 饮水。术后禁食72h后给予常规饮食。于术后72h用不同剂量的丹参注射液肌肉注射至术后 4周。分别处死各组大鼠，抽血留取血清， -20℃保存；取胰腺组织，用福尔马林溶液固 定。实验前将血清置室温复溶, 转离心, 取上清液进行测定。采用光度酶联免疫分析法 （ELISA）检测胰腺正常组、对照组、干预组中的LN和HA的含量，并用HE染色法观察慢性 胰腺炎组织中纤维化的变化。 结果 对照组大鼠慢性胰腺炎胰腺组织明显病理变化。胰管内注射2%三硝基苯磺酸后 发现胰腺组织立即充血肿胀，4周后处死大鼠，取出胰腺组织，可见胰腺体积明显变小， 质地硬化，且与周围组织分界模糊不清，高倍镜下可见胰腺间质炎性细胞浸润, 大量纤维 组织增生，致密的胶原和成纤维细胞增生将胰岛细胞分割；胰泡细胞缺失及部分腺泡空泡 样变，胞体皱缩钙化，胰管增生扩张，管周纤维组织增生, 管周及胰腺小叶间和小叶内纤 维化伴大量炎症细胞浸润。丹参干预组中亦发生胰腺纤维化，但丹参干预组较模型组纤维 I 山西医科大学硕士学位论文 化程度明显减轻，且随着丹参注射液剂量的增加胰腺纤维化程度呈逐步减轻的趋势。将五 组大鼠胰腺组织病理切片进行纤维化评分，发现对照组评分高于丹参干预组，纤维化程度 较高。ELISA法测试表明：干预组中LN和HA的含量明显低于对照组，且差异显著。 结论 丹参注射液具有抗大鼠慢性胰腺炎胰腺组织纤维化的作用。通过丹参注射液对大