乙酰胆碱酯生物传感器表面材料的修饰.pdf

第26卷增刊 分析试验室 V01．26．sm,1． of 2007年10月 Journal 2()(77—10 Chin—e—se Analysislaboratory 乙酰胆碱酯生物传感器表面材料的修饰 袁金凤，王朝瑾睾 (上海水产大学食品学院，上海200090) 摘要：比较了溶胶．凝胶技术和戊二醛交联法将乙酰胆碱酯酶固定在玻碳电 极上制备电流型生物传感器，采用循环伏安法考察不同条件下对乙酰胆碱酯酶 催化性能的影响。结果表明溶胶一凝胶技术固定酶具有较好的灵敏度、稳定性和 重现性。 关键词：生物传感器；乙酰胆碱酯酶；固定化 生物传感器是利用生物活性组分特有的识别 学行为进行考察，并与戊二醛交联法固定AChE进 能力与可感知这一识别过程的信号转换器结合在 行比较，旨在能研制性能优良的AChE传感器。 一起组成的一种小型分析器件u]。具有选择性好、 1实验部分 灵敏度高、分析速度快、操作简便、成本低等特点 1．1仪器与试剂 适合于在线或活体检测。尽管目前真正商品化意 CHl600A电化学分析仪(上海辰华仪器公司)； 义上的生物传感器还为数不多，但作为一种多学 精密型酸度计(上海雷磁仪器厂)；涡流旋涡混合 科交叉的高科学技术，生物传感器将发展成为一 器；三电极系统：玻碳电极作工作电极、铂电极作 种强有力的生命科学分析工具。 对电极、饱和甘汞电极作参比电极；88．)型定时 其中，生物活性组分的固定化是生物传感器 恒温磁力加热搅拌器；10、25、50v-L微量进样器 研制开发的重要基础。固定化技术是提高生物传 (宁波市镇海玻璃厂)；混合纤维微孔滤膜(孔径 感器性能的关键因素，它决定该生物传感器的稳 0．45／an)(上海亚东核级树脂有限公司)。 定性、可靠性及其使用寿命。材料科学的发展将 乙酰胆碱酯酶(500U，Sigma公司)，氯化乙酰 会为生物分子的固定化技术带来新的发展空间。 硫代胆碱(Sigma公司)；牛血清白蛋白(华美生物 目前，生物分子的固定化技术主要包括：物理吸 工程公司)；25％戊二醛溶液(中国医药集团上海 附法、共价键合法、交联法及包埋法。上述几种方 化学试剂公司)；正硅酸四乙酯(TEoS，中国医药集 法均存在一些弊端，如物理吸附容易发生生物分 团上海化学试剂公司)；聚乙二醇400(PEG400，中 子的泄漏，共价键合或交联法易导致生物活性分 国医药集团上海化学试剂公司)；Na：HP04、 子部分失活等。 KH：PO,均为分析纯；实验用水为去离子水。 溶胶．凝胶材料所具有的诸多特性，如可低温 1．2酶电极的制备 包埋、孔径可控性、不溶胀性、化学惰性、物理刚 1．2．1戊二醛交联法依次取63％的牛血清 t,-L 性、光透性、易于制备以及良好的生物相容性等 5％的戊二 白蛋白、5止(0．2u／血)AC}lE及2t,-L 优点用于各类生物传感器的研制已引起了人们极 醛溶液于1mL的塑料离心管中，充分混合均匀。 大的关注【2。J，该技术的发展为生物分子