第八细菌和噬菌体的遗传重组.pptVIP

第八章 细菌和噬菌体的遗传重组 第一节 基因和产物的符号 细菌: 表型 野生型 Gal＋，突变型 Gal－或 Gal； 基因型 野生型 gal＋ 突变型 gal－ 或 gal 酵母: 啤酒酵母 基因: GAL4,CDC28 蛋白质:GAL4,CDC28 非洲粟酒酵母 基因: gal4,cdc2 蛋白质:Gal4, Cdc2 果蝇: 以1-4个字母表示。 基因:white(w ),tailless( tll ),hedgehog( hh ); 蛋白:White, Tailless, Hedgehog 植物: 没有惯用法，大多数用1-3个小写字母表示。 Arabidopsis 基因用果蝇的方法命名但用大写字母， 如 基因 AGAMOUS(AG)，蛋白 AGAMOUS。 脊椎动物: 一般以1-4个小写字母表示其基因功能。 例如，基因sey, myc, 蛋白 Sey, Myc 人类: 方法如脊椎动物但需大写。 例如基因 MYC、SRY，蛋白MYC、ENO1。 基因产物的命名无统一的规定，现在一般都用正体, 全部大写，或第一个字母大写，如Gal或GAL。  第二节 细菌转化 在细菌中遗传物质有三种转移的形式: 转化（transformation） 接合（conjugation） 转导（transduction） 共同特点是： （1）单方向转移； （2）产生部分二倍体（partial diploid）； （3）基因只有整合到环状染色体上才能稳定 地遗传。 自然转化（natural transformation） 在自然转化中细菌可以自由地吸收 DNA，通过它来进行遗传转化；枯 草杆菌中的转化属于自然转化。 工程转化（engineered transformation） 在这种转化中，细菌发生改变使得它 们能摄入并转化外源DNA。E.coli 转 化就属于工程转化。 接合 是DNA从细胞到细胞直接转移。 转化 细胞从周围介质中吸收裸露的DNA。 转染 对裸露的病毒基因组DNA/RNA的吸收。 （在动物细胞中，从周围介质中吸收任何裸 露DNA都称为转染。在酵母和植物细胞中 导入裸露的DNA可以称为转染或转化) 转导 通过病毒颗粒介导将染色体或质粒DNA转移到细胞中。 普遍性转导:宿主 DNA片断可能取代病毒基因组被包装在噬菌粒中 (1) 载体为P1,P22噬菌体; (2) 经错误包装宿主DNA片断和同源重组；(3) 转移任何片断。 特异性转导:宿主 DNA共价地加入到病毒基因组中 (1) 载体为λ噬菌体; (2) 经特异位点整合或同源重组; (3) 转移特定的基因。  第三节 细菌的接合 一、E.coli 接合的发现 1946年莱德伯格(Lederberg, J.) 和塔特姆 (Tatum) 发现细菌的接合（conjugation）。 细菌接合是指通过细胞的直接接触，遗传信息从供体单向转移到受体的过程。 两大难题： ⑴ a＋b－×a－b＋→ a＋b＋ (10-7 ） 和回复突变频率相近，难以区别。 (2) E.coli杂交产生重组频率为10－7， 筛查重组子的工作量太大。 解决的方法： (1)使用多重突变型（multiple auxotrophs） (2)是采用基本培养基和选择培养基 细菌同宗配合（homothallic） A品系：met－ bio－ thi＋ leu＋ thr＋（thi：硫胺素B1） B品系：met＋ bio＋ thi－ leu－ thr－ A A+B B 基本培 养基 met ＋ bio ＋ thi＋ leu＋ thr＋ 质疑： ⑴ 细菌的杂交实验获得的重组子可能是转化的结果。 ⑵ 培养基中含有某些