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一.实验原理:
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:
①.还原性糖的鉴定:
还原性糖+
②.脂肪的鉴定:
脂肪+
脂肪+
③.蛋白质的鉴定:
蛋白质+
④淀粉 +
斐林试剂
砖红色沉淀
苏丹Ⅲ染液
橘黄色
苏丹Ⅳ染液
红色
双缩脲试剂
紫色
碘
蓝色
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二.目的要求:
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
1、还原糖的检测和观察:
选材 应该选择含 量高.颜色为
以苹果.梨为最好。
糖
白色或近于白色
制备组织样液:
制浆 过滤 取液
三.实验过程:
用一层纱布
的植物组织,
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可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明植物组织样液中含有还原糖。
注入2mL苹果组织样液
注入1mL刚配制好的斐林试剂
水浴加热约2min
呈色反应
变成砖红色
50----650C的温水
甲乙液等量混匀现配现用
振荡、混合摇匀呈现蓝色
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①还原糖有 。
②试剂: . (甲液:0.1g/ml
的 , 乙液:0.05g/ml的 .)
甲乙液必须 后再加入样 液中, 。
③必须 。
葡萄糖,果糖,麦芽糖
用水浴加热
斐林试剂
NaOH
CuSO4
等量混合均匀
现配现用
注意事项:
④颜色变化:
浅蓝色
棕色
砖红色
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思考:
1.为什么加入斐林试剂甲液和斐林试剂乙液时必须混合后再加入?
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因为若先加入NaOH溶液,还原性糖中的还原性半缩醛羟基易被氧化而失去还原性,再加入CuSO4溶液后不能产生Cu2O砖红色沉淀,只有将其先配成Cu(OH)2悬浊液,才可产生砖红色沉淀。
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2.斐林试剂甲液和乙液既然混合后使用,为什么不能在实验前配制好,一定要使用时临时配制?
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由一分析可知,鉴定试剂实质上是Cu(OH)2悬浊液,很不稳定,容易生成蓝色Cu(OH)2沉淀,所以应将甲液、乙液分别配制储存,使用时再临时配制
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