2016届二轮 基因工程与细胞工程 专题卷.docVIP

1．(2015·江苏两市一模)为增加油菜种子的含油量研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。 (1)研究人员依据基因的已知序列设计引物采用________法从陆地棉基因文库中获取酶D基因从拟南芥基因文库中获取转运肽基因所含三种限制ClaⅠ、、)的切点如图一所示。则用____________和________酶处理两个基因后可得到_____端与_____端(填图中字母)相连的融合基因。(2)将上述融合基因插入图二所示Ti质粒的T-DNA中构建____________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落再利用液体培养基振荡培养可以得到用于转化的侵染3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间此过程的目的是______________________________进一步筛选后获得转基因油菜细胞该细胞通过________________技术可培育成转基因油菜植株。(4)用____________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。解析：(1)由题中“已知序列设计引物”可想到PCR扩增DNA的做法。由图示中酶D基因和转运肽基因都有酶切位点想到用酶酶切后酶DA端和转运肽基因的D端可用DNA连接酶将其连成融合基因。(2)将融合基因插入Ti质粒可形成重组质粒或者基因表达载体。由Ti质粒上具有四环素抗性基因所以想到在培养基上添加四环素以实现目的基因的筛选和鉴定。(3)油菜的叶片放入侵染液中一段时间后能筛选获得转基因油菜说明侵染液中有农杆菌用农杆菌转化法将融合基因导入油菜细胞中。转基因油菜细胞培育为转基因油菜植株用植物组织培养技术。(4)检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达即检查转基因油菜中是否合成了融合基因相应蛋白所以用抗原—抗体杂交技术。答案：(1)PCR　　DNA连接　A　D(2)基因表达载体(或“重组质粒”) 　四环素(3)利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞　植物组织培养(4)抗原—抗体杂交(2015·宁夏银川三模)转基因抗虫棉是人们应用较早的基因重组技术推广项目目前转基因技术有了新的改进如下图所示请根据所学知识回答： (1)图中转基因过程通常选择的限制酶是____________________启动子的作用是与________________识别和结合从而驱动基因的转录过程。目的基因与载体结合主要依靠二者含有共同的________________。(2)需要进行离体组织培养的过程是________(用标号)。由棉株1获得单倍体苗的途径为：花粉通过诱导首先形成________进而再分化为试管苗。一般试管苗的形成先诱导生成________(“丛芽”或“根”)说明原因________________________________________________________________________。(3)棉株1、2、3中各随机取出一个叶肉细胞其细胞核中含有的目的基因个数分别为________。解析：(1)分析图示可知目的基因的两侧以及质粒上都有和HⅠ限制酶的识别位点所以图中转基因过程通常选择的限制酶是和。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位所以启动子的作用是与RNA聚合酶识别和结合从而驱动基因的转录过程。目的基因与载体结合主要依靠二者含有共同的黏性末端。(2)由棉株1获得单倍体苗的①过程为花药离体培养需要用到植物组织培养技术由受体细胞培养成棉株2的③过程也需用到植物组织培养技术所以需要进行离体组织培养的过程是①和③。棉株1的花粉通过诱导首先形成愈伤组织进而再分化为试管苗。试管苗的形成一般先诱导其生成丛芽3)图示显示目的基因导入的受体细胞来源于单倍体幼苗由受体细胞通过③过程培养成的棉株2为单倍体由棉株2通过④过程培养成棉株3需要人工诱导染色体加倍目的基因也随之加倍所以棉株1、2、3中各随机取出一个叶肉细胞其细胞核中含有的目的基因个数分别为0、1、2。答案：(1)和　RNA聚合酶　黏性末端(2)①和③　愈伤组织　丛芽　进行光合作用合成有机物利于生长(3)0、1、2(2015·山东文登二模)下面是科学家利用现代生物技术研制用于癌症治疗的鼠—人嵌合抗体的流程图。请回答： (1)利用蛋白质工程技术对鼠源杂交瘤抗体进行改造时首先必须根据预期________________设计________________进一步推测应有的氨基酸序列最终通过基因拼接将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因然后导入鼠淋巴细胞中使其________。在Ig基____________切割核苷酸之间的磷酸二酯键。(2)图中嵌合载体启动子位于基因的首端它是______识别和结合的部位终止子是________的终点；嵌合载体中还应含有_________