微生物学实验课一绪论.ppt

医学微生物实验 Experiment of Medical Microbiology 巩固基础理论、基本概念 学习基本操作 树立无菌概念 微生物实验目的 实验室规则: 1.必须穿白大衣； 2.尽量保持安静； 3.自己的实验器材(试管、平皿等)注明菌种、 日期、组、姓名； 4.除示教片以外，沾染过传染物的实验器材必须放入消毒缸； 5.注意安全；不要随意调动实验室仪器。 6.实验结束后，泡手、洗手。 实验一 实验内容： 1.油浸镜的使用 2.细菌的基本形态 3.细菌的特殊结构 实验要求: 1.掌握普通光学显微镜的基本构造、使用方法、保护要点。 2.掌握普通光学显微镜油浸系的原理。 3.使用油镜观察几种细菌的基本形态。 实验器材： 1.显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、纱布等。 2.染色标本 (基本形态4)(特殊结构3)(红细胞与葡萄球菌对比标本1) Antony van Leeuwenhock 自制单式显微镜观察到细菌等微生物个体 实验原理： 1.显微镜的构造： 普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合，才能发挥显微镜的作用。 （1）显微镜的机械装置 显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件。 （2）显微镜的光学系统 显微镜的光学系统由反光镜，聚光器，接物镜，接目镜等组成，光学系统使物体放大，形成物体放大像 。 根据物镜放大率的高低，可分为： ①低倍物镜 10×； ②高倍物镜 40×； ③?油浸物镜 100×。 普通光学显微镜常用的目镜为10倍平场目镜（P）。 光学显微镜的构造 1. 物镜转换器 2. 接物镜 3.游标卡尺 4.载物台 5.聚光器 6. 彩虹光阑 7.光源 8. 镜座 9. 电源开关 10. 光源滑动变阻器 11. 粗调螺旋 12. 微调螺旋 13. 镜臂 14.镜筒 15.目镜 16.标本移动螺旋 显微镜的几个常用系数： a.放大倍数=接物镜放大倍数×接目镜放大倍数 b. 分辨率 ： 是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力。 c. 数值孔径 ：也叫做镜口率（或开口率），它与显微镜的分辨力成正比，与焦深成反比，与镜象亮度的平方根成正比。 2.油镜使用的原理 油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。 加入中间的介质是一层香柏油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 实验方法： 一、观察前的准备 1、显微镜移动时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜放在实验桌上。 2、将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右，右侧可放记录本或绘图纸。 3、调节光照:打开光源，并将光圈调到100的位置，调节光源旋钮，使视野达到最亮。 4、调节瞳距：双筒显微镜可以调节瞳距，将刻度对准使用者瞳距大小的位置，可以使视野更加清晰。 使用油镜按下列步骤操作： 1、先用粗调节旋钮将镜筒提升（或将载物台下降）约2cm，并将高倍镜转出。 2、在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油（盖玻片朝上，油滴在盖玻片中间或者有明显颜色的位置）。 二、油镜观察 3、从侧面注视，用粗调节旋钮将载物台缓缓地上升，使油浸物镜浸入香柏油中，使镜头几乎与标本接触（物镜头弹簧刚好被压缩回去即停止旋转旋钮）。 4、从接目镜内观察，用粗调节旋钮将载物台徐徐下降，当出现物像一闪后改用细调节旋钮调至最清晰为止。如油镜已离开油面而仍未见到物象，必须再从侧面观察，重复上述操作。 下降载物台，将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的油，再用擦镜纸蘸少许乙醚乙醇混合液擦去镜头上残留油迹，最后再用擦镜纸擦拭2—3下即可，（注意向一个方向擦拭）。 将各部分还原，转动物镜转换器，使物镜头不与载物台通光孔相对，而是成八字形位置，再将载物台下降至最低，降下聚光器，反光镜与聚光器垂直，最后用柔软纱布清洁载物台等机械部分，然后将显微镜放回柜内或镜箱中。 三.观察完后复原 1.学生使用显微镜固定镜号、位置，填写使用卡，本学期一直使用本台显微镜。 2.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 3.镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度。 注意事项： 4.观察标本时，当目视接目镜时，物镜头弹簧缩回去之后，切不可继续顺时针使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。