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49例凝聚胺交叉配血不合的原因分析.doc
49例凝聚胺交叉配血不合的原因分析
摘要:为探讨凝聚胺交叉配血不相合的原因分析及解决办法,对本院近几年来输血科出现的凝聚胺交叉配血不合的49例病例资料进行分析,发现主要存在冷凝集因素20例(40.82%);纤维蛋白原过高因素8例(16.33%);自身免疫性温性抗体因素6例(12.24%);操作方面的因素6例(12.24%);血型鉴定错误6例(12.24%);药物干扰因素3例(6.13%)。
关键词:凝聚胺;交叉配血;不合的原因;解决方法
交叉配血试验是在血型鉴定的基础上,进一步检查受血者和供血者血液中是否含有不相配的抗原和抗体成分的试验。以确保临床用血安全。凝聚胺交叉配血法具有快速、灵敏、结果可靠,可以检出IgM与IgG两种性质的抗体,能发现可引起溶血性输血反应的几乎所有规则与不规则抗体,适合各类患者交叉配血等优点。目前在基层医院被广泛推广使用。但在实际应用中,此法也存在很多干扰因素,造成交叉结果的假阳性及不合,虽然不至造成输血事故,但可干扰延误输血时间,每个输血工作者都应了解其产生的原因,以减少差错。本文就本院近年来49例凝聚胺交叉配血不合的原因分析及相应的解决方法报道如下:
1资料与方法
1.1标本 选自2007年~2015年本院输血科出现的凝聚胺交叉配血不合的49例病例资料。
1.2试剂与仪器 BaSO由珠海贝索生物技术有限公司提供的BASO-Polybrene试剂,试剂由低离子溶液(Low Ionic Medium)凝聚胺溶液(Polybrene Reagent),悬浮液( Resuspending)组成,所有试剂都在有效期内。
1.3方法 ①取试管二支两支,标主次侧,主管加病人血清(血浆)2滴,加供血者3%~5%红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴,次侧管反之。②各加LIM0.65 ml,混合均匀后,再各加Polybrene试剂2滴,并混合均?颉"塾美胄幕?3400 r/min(相当于1000 g离心力)离心10 s,然后把上清液掉到,不要沥干,让管底残留约0.1 ml液体。④轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做。⑤最后向主、次侧管各加入Resuspending试剂2滴,轻轻摇动试管混合并同时观察主次侧结果。并倒在玻片上用显微镜观察,如果在60 s内凝聚散开,代表是由Polybrene引起的非特异性聚集,配血结果相合;若凝集不散开,说明此凝集是红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合。
1.4试验原理 凝聚胺技术首先利用低离子溶液(LIM),降低介质的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体结合,其后,加入凝聚胺(Polybrene)溶液可中和红细胞表面的负电荷,缩短红细胞之间的距离,使红细胞产生非特异性的凝集,最后,加入悬浮液(Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)阳离子的作用,使正常的红细胞非特异性凝集散开。
2结果
对这49例凝聚胺交叉配血不合的的结果进行分析后,发现主要存在有冷凝集因素20例(40.82%)、纤维蛋白网罗红细胞因素8例(16.33%),自身免疫性温性抗体因素6例(12.24%);操作方面的因素6例(12.24%);血型鉴定错误6例(12.24%);药物干扰因素3例(6.13%)。
3讨论
3.1 检测共发现20例冷凝集引起的假阳性 大量临床和实验研究的资料表明,自身免疫性溶血性贫血、肝硬化、红斑性狼疮等患者的血清中,可以出现高效价的病理性的自身冷性抗体能与本人及其他各型人的红细胞发生凝集,此种现象在冬天尤为明显。此类假阳性的处理措施是在最后滴入Resuspending时,将试管置入37℃的水浴箱中,轻轻摇动试管混合使冷凝集散去,并在60 s内观察结果。
3.2检测共发现8例由纤维蛋白原增高而导致的假阳性 某些心肌梗死、感染、外伤及肿瘤病人的纤维蛋白原增高;或由于血液粘稠度的增高引起红细胞互相叠连,呈串钱状;或标本离心时间过短,血清未完全析出,至使加悬浮液后肉眼观察凝集不散开,显微镜下可见片状凝块,与真凝集难以区分,解决方法为:①观察结果前,再加等渗盐水1滴,彻底混匀,串钱状红细胞因血液稀释而散开。②将患者红细胞洗涤后再重新做实验。③将标本置于37 ℃ 水浴箱中20 min~30 min,待血清自然析出再重新做实验。
3.3检测共发现自身免疫性温性抗体抗因素6例 自身免疫性溶血性贫血患者血清中可有温性自身抗体,其反应温度在37℃比室温作用强或相同,能凝集自身和其他各型红细胞。因此在一些疾病经药物治疗后引起自身抗体存在时,则应加强预防药物性溶血性贫血,减少输血。解决方法为①用递增温度的盐水洗涤红细胞后,在进
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