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4.固定化酶稳定性 在反应器操作过程中—— 由于搅拌或液流的剪切作用,常会使酶从载体上脱落下来 由于磨损而使粒度变细,从而影响了固定化酶的操作稳定性。其中,尤以CSTR最为严重。 改进CSTR反应器的设计:把酶直接黏结在搅拌轴上,或者把固定化酶放置在与轴相连的金属网筐内。这些措施均可使酶免遭剪切,对提高酶的稳定性起一定的作用。 9.2 酶反应器的选择 5.操作要求及反应器费用 在CSTR中可方便进行的操作:不断调节pH,经常供应氧气,间断地加入或补充底物,更换或补充酶,对固定化酶进行清洗和灭菌等。 在其他反应器中进行甚难。 CSTR结构简单,造价最低,而且有较大的操作弹性及应用可塑性,其他的反应器,则需要为特定的生产过程专门设计和制造,造价较高。 9.2 酶反应器的选择 第三节 固定化酶反应器的操作 1.操作中存在的问题: 酶的稳定性对酶反应器的功效是很重要的。 在操作过程中,有时需要用酸或碱来调节反应液pH。如果局部的pH过高或过低,就会引起酶的失活,或者使底物和产物发生水解反应。这时,可用加快搅拌以促使混合均匀。但这样做,有可能使游离酶因起泡而变性,使固定化酶破碎。 如果底物和产物在反应器中不够稳定 采用高浓度的酶,以减少底物和产物在反应器中的停留时间,从而减少损失。 固定化酶:增加单位质量载体上含酶量(酶的总量不变) ,获得较高的单位体积的酶活力。 欲使更多的酶固定到载体上去,就要增加载体的表面积,也就是说,要设法增加载体的空隙率,或采用较小的载体。 2.酶反应器生产能力下降的原因及对策 生产能力逐渐下降的原因是多方面的。主要原因是固定化酶活性的下降或损失。造成固定化酶活性的损失可能有下列原因: (1)酶本身的失活。 (2)酶从载体上脱落。 (3)载体的破碎或溶解。 9.3 固定化酶反应器的操作 酶变性:一般是由于受到热、快速搅拌所产生的高剪切力和泡沫所引起的。防止变性——操作温度不宜过高,搅拌速度不宜过快。 中毒:由底物溶液中的重金属离子等毒物所引起。防止中毒——所用试剂和水不含毒物。 微生物污染:微生物的蛋白酶能使酶活力损失。防止微生物污染——可以提高操作温度(45℃),并使反应液的pH尽量偏离中性。如果此法不适用时,也可以将底物溶液进行过滤除菌,或者用甲苯或甲醛进行处理。 (1)酶 本 身 的 失 活 2.酶反应器生产能力下降的原因及对策 (2)载体的破碎or酶从载体上脱落 颗粒状固定化酶,特别是微胶囊包埋的固定化酶:在搅拌式反应罐中,由于搅拌所产生的剪切力的作用,可以使它破碎。固定床反应器,由于高流速的底物溶液所产生的摩擦力的作用,可以使固定化酶的载体变成小颗粒。这些小颗粒难以停留在反应器中维续使用。 吸附法制备的固定化酶在反应器中与反应液长时间接触时,常发生解吸。 2.酶反应器生产能力下降的原因及对策 (3) 载体的溶解 如果固定化酶的载体是亲水性聚合物,在酶促反应过程中,载体逐渐被溶解。 对策——载体的化学结构力求均一,可以避免溶解。 2.酶反应器生产能力下降的原因及对策 在反应器中,酶的表观活力可因反应器中液体流动状态不规则,或者在反应器中分布情况变坏而下降。 例如:当反应器中有超滤膜截留大分子物质时,酶或固定化酶可能在出口处积累;如果底物溶液中有油脂、多糖等物质将固定化酶包裹时,酶活力会因此而下降。 酶反应器的设计 1、确定酶反应器的类型 酶反应器的设计,首先要根据酶、底物和产物的性质,按照上一节所述的选择原则,选择并确定反应器的类型。 2、确定反应器的制造材料 由于酶催化反应具有条件温和的特点,一般采用不锈钢制造反应容器即可。 3、进行热量衡算 酶催化反应一般在30~70℃的常温条件下进行,所以热量衡算并不复杂。温度的调节控制也较为简单,通常采用一定温度的热水通过夹套(或列管)加热或冷却方式,进行温度的调节控制,热量衡算是根据热水的温度和使用量计算。对于某些耐高温的酶,例如高温淀粉酶,可以采用喷射式反应器,热量衡算时,根据所使用的水蒸气热焓和用量进行计算。 4、进行物料衡算 酶反应动力学参数/底物用量/酶量/反应体积/反应器数量 第九章 酶反应器 Reactors for enzymatic catalysis 本章主要内容 第二节 酶反应器的选择 第一节 酶反应器 第三节 固定化酶反应器的操作 9.1 酶反应器 通过反应器型式、操作方式的改变能否使生物催化反应效率最大化? 1. 什么是酶反应器? 酶和固定化酶在体外进行催化反应时,都必需在一定的反应容器中进行,以便控制酶催化反应的各种条件和催化反应的速度。 用于酶进行催化反应的容器及其附属设备称为酶反应器。 酶反应器是用于完成酶促反应的核心装置。它为酶催
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