基于微纳技术的生命分析化学新方法研究.pdfVIP

P一012 基于微纳技术的生命分析化学新方法研究 夏主避‘ (南京大学化学化工学院，生命分析化学教育部重点实验室，江苏，南京210093,E-mail： xhxia@nju．edu．ctl) 微纳技术是在微技术和纳技术发展相当成熟的基础上发展起来的一个新研究方向．纳米材料具有 的特性，使得其在生物分析中具有重要的地位，如利用纳米材料能提高生物分子在电极表面的组装 密度，同时能保持生物分子的生物活性与催化活性，为构建生物传感与生物分子电子器件提供了广 阔的前景；利用纳米材料的尺寸效应，将其作为生物分子的电子传输通道，可建立具有电活性蛋白 质、酶等生物分子的直接电化学，提高电子传输速率。我们将从如何通过微纳技术，在单位面积上 有效组装生物分子，提高生物分子的组装密度以及生物分子在外场作用下所表现的结构与表面性质 的变化；同时，提出了基于微纳技术的生物分析新原理、新方法与新技术。 ， 生物分子高功能密度组装及生物传感：利用电化学沉积技术在光子晶体三维模板中沉积了多种金 属材料，以化学法溶解模板后获得高真实面积的三维有效多孔金属膜电极，这种电极结构具有高表 面积外，外具有三维贯通以及纳米材料的特征。首先利用生物分子的非特异性吸附，在三维电极表 面组装单层生物分子，当组装了具有氧化还原中心的蛋白质后，因具有纳米材料的特异性质，可实 现高功能密度的直接电化学．同时，我们还研究了界面电场对生物分子组装的速度与结构进行了系 统的研究，发现高表面电场可加速生物分子在电极表面的组装，但是会导致生物分子的二级结构的 破坏和失去生物活性．另外，采用表面分子表征技术与表面形貌与性质的表征技术，研究了同位素 放射对蛋白质结构与性质的影响．另一方面，我们也将该材料用于葡萄糖的直接电化学分析。葡萄 糖在Pt电极上催化氧化为表面控制步骤，其反应电流与电极的证实面积成正比，而抗坏血酸等干扰 物质的电催化氧化过程为扩散控制，其反应电流只与电极几何面积成正比，故我们采用高真实面积 的Pt电极实现了对葡萄糖的直接电化学分析． 扩散层电极对原理与微型器件：提出了利用扩散层电极对选择性检测的新方法，并以过氧化氢为 检测对象验证了所提出方法的有效性．该方法利用扫描电化学显微镜(SECM)将微探针定位于宏 观金盘基底电极的扩散层内，构成扩散层间隙电极对，通过向基底电极施加适当电位以氧化消除电 活性干扰物质(如抗坏血酸)，提高探针电极检测过氧化氢的选择性．基于此方法，系统研究了探 针一金基底电极间距和电极电位对铂微探针检测过氧化氢选择性的影响． 在扩散层电极对选择性检测的新方法提出的基础上，我们构建了在探针电极一非导电与导电生物 相容性界面修饰基底电极扩散层间隙电极对，并实现了基底电极扩散层中探针电极选择性检测葡萄 糖．通过控制葡萄糖氧化酶修饰的基底电极电位，有效消除了扩散层中电活性干扰物质如抗坏血酸 对葡萄糖检测的影响．通过SECM系统，将微铂电极定位于基底电极扩散层中，构成探针电极一非 导电生物相容性界面修饰基底电极扩散层间隙电极对，利用探针铂电极对酶促反应中生成的过氧化 氢的氧化实现了对葡萄糖的无干扰测定，并系统研究了各种实验变量对基于电化学方法消除电活性 干扰物质的检测方式的影响．结果显示，该方法消除干扰的能力由探针一基底距离及施加于两电极 上的电位决定． 我们进一步利用提出的扩散层电极对概念，研制了微型生物传感器件，理论模拟与实验结构都表 明的所建立的方法的合理性与可行性。 同时，提出了制作高效微混合器的新方法，通过构建高集成式的微酶反应器，建立了获取酶反应 动力学的离线式米氏方程． 本研究为国家自然科学基金和创新研究群体资助项目． 参考文献： 【l】D．Zhang,K．Wang,D．C．Sun，X．HXia,,H．Y．Chen，Chem．Mater．2003，15(22)：4163． 2004，20：7303． 【2】D．Zhang，ICZhang，Y．L．Yao，X．H．Xia，H．Y．Chen，Langmuir 【3】J．H．Yuan，F．Y．He，D．C．Sun，X．H．Xia,Chem．Mater．2004，16：1841．