基于特殊环境产13丙二醇菌株的筛选及其发酵条件初探.pdfVIP

发酵工程学科的进展 ——第四擞奎面发酵工程学术讨论套论文集 基于特殊环境产1。3一丙二醇菌株的筛选 及其发酵条件初探 马彬彬1，张根林1，徐小琳1，李春““ (1．石河于大学化学化工学院．新疆石河子832003f 2．北京理工大学生命科学与技木学院，北京100081) 摘要：利用自行筛选培养基从新疆特殊环境中得到5株合成1，8-丙二醇的微生物菌株，通 过复筛，茁株X．IPDLi-I合成1，8-丙二醇的产量较商．同时研究了该菌株培养条件及合成1，3 一丙二醇的发酵条件。该菌株最佳生长温度为40℃，在发酵初始pH为7．5，硫酸铵0 g／L，外 加2．Sg／L葡萄糖，底物甘油为20g／L时，发酵8h，1，3-丙二醇的浓度迭12．38g／L，库尔转 化率为o．75tool／tool，生产强度为1．54g／L·h。 关键词：1，8-丙二醇，筛选，发酵 前言 1，3-丙二醇(1，3-PD)是一种重要的化工原料，主要用于合成聚酯、聚氨酯。以1，3- PD为单体生产的聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)是一种新型聚酯材料，具有许多独特的 性质，如尼龙般的弹性恢复、良好的着色性、抗紫外、抗静电及良好的生物降解性等o]。 用在内的全球PTT需求量将达到每年一百万吨口]。 生物法合成1，3-PD具有反应条件温和、环境友好无污染等优点，但由于产物浓度和 转化率较低使生物法合成的生产成本在与化学法的竞争中未占优势o]。目前一些大型 深人的研究．推动了生物法合成1，3-PD的产业化[““。 通过在新疆特殊环境中采样，对其中微生物进行分离筛选，获得能利用甘油合成1，3 一PD的菌株，并对所筛菌株发酵条件进行了优化。 1材料与方法 1．1菌种 菌种：本实验室保存菌种(石河子周边地区、克拉玛依油田等地筛选得到) 霍英东青年基金(101071)和新疆特殊环境微生物重点实验室开放课题()(JYS0203— 2004-03) 010803 *通讯联系人：李春，教授、博士生导师，Tell IEmailllichun04@bit．edu．cn 马彬彬等；基于特殊环境产1，3-丙二醇菌株的筛选及其发酵条件初探 101 1．2培养基 (”固体培养基(g／L)：LB培养基，用于菌株保藏及活化。 (2)限制性培养基(g／L)：甘油20，硫酸铵6，NaCI1，pH7．0，用于菌种初筛。 (3)发酵(种子)培养基(g／L)：K：HPO．·3H：O ml， 0，MgSO|．-7H200．2，CaCh·HzO0．02，酵母粉1．0，甘油20．0，微量元素贮液1．0 铁溶液2．0ml，用于菌种复筛及发酵研究。 (4)铁溶液：5g／L的硫酸亚铁(FeS04·7H20)溶液加入4ml浓盐酸(37％)。 1．3培养方法 (1)斜面培养：恒温培养箱40℃。 (2)种子培养：挑取活化菌株接人厌氧培养摇瓶，通入氮气维持厌氧环境，40℃水褡 摇床培养12h，摇床转速50rpm。 (3)发酵培养：4022恒温水浴摇床培养，通人氮气维持厌氧环境，通气比0．1vvm。 1．4分析方法 Onm CLASS—VPVersion 6．12 10A型高效液相色谱测定，分析软件为SHIMADZU SPl；色谱 柱AminexHPX一87H柱，柱温65℃，流动相0．005mol／L的H2S04，流速0．8ml／min RID