第24章.病毒感染的检查方法和防治原则终稿.pptx

第二十四章 病毒感染的检查方法与防治原则 第一节 病毒感染的检查方法 （一）标本的采集与送检 采集急性期标本 根据感染性质取不同的标本 标本置于病毒转运液 使用抗生素以抑制标本中细菌或真菌等生长繁殖 冷藏保存、快速送检 采集双份血清 （二）病毒的分离培养 动物接种：尚无敏感细胞 隐性感染、免疫抵抗力、接种量 鸡胚培养：鸡胚对多种病毒敏感 绒毛尿囊膜接种：天花病毒、痘病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔接种：流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔接种：流感病毒 卵黄囊接种：嗜神经病毒 细胞培养 细胞培养 原代细胞 有限细胞系 连续(或无限)细胞系 悬浮型细胞 贴附型细胞 二倍体细胞 异倍体/非整倍体细胞 细胞病变 红细胞吸附 病毒干扰作用 细胞代谢的改变 Vero细胞，EV71 MRC-5细胞，CoxA16 Hep-2细胞，腺病毒 （三）病毒的鉴定 病毒形态学检查 电镜和免疫电镜检查 光学显微镜检查：包涵体 病毒抗原检测 病毒核酸检测 Hep-2细胞分离腺病毒电镜检测 流感病毒感染猪肺部组织电镜检测 艾滋病患者血清的免疫电镜，在病毒颗粒表面可见到铁蛋白颗粒的吸附 病毒形态学检查 病毒抗原检测 免疫学标记技术 蛋白印迹技术 血凝抑制试验 病毒核酸检测 病毒形态学检查 病毒抗原检测 病毒核酸检测 核酸扩增技术 核酸杂交技术 基因芯片技术 基因测序技术 TaqMan探针法 CYBR Green染料法 病毒形态学检查 病毒抗原检测 病毒核酸检测 核酸扩增技术 核酸杂交技术 基因芯片技术 基因测序技术 （四）病毒数量与感染性测定 50%组织细胞感染量(TCID50) 空斑形成试验(plaque formation test) 有感染性的病毒经适当稀释后接种于单层细胞，经一定时间培养后，覆盖薄层未凝固的琼脂于细胞上，待其凝固后继续培养，由于单个病毒的复制增殖使局部单层细胞脱落，此即空斑，经染色后空斑可用肉眼观察 空斑形成单位(plaque formation unit, PFU) 计算空斑数可推算出样品中活病毒的数量(pfu/ml) 红细胞凝集试验/血凝试验 （五）病毒感染的血清学诊断 中和试验(neutralization test) 血凝抑制试验(hemagglutination inhibition test, HI) ELISA、IFA 第二节 病毒感染的特异性预防 （一）人工主动免疫常用生物制品 灭活疫苗 减毒活疫苗 亚单位疫苗 基因工程疫苗 重组载体疫苗 核酸疫苗 （二）人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白 血清丙种球蛋白 特异性免疫球蛋白 细胞免疫制剂 细胞因子 第三节 病毒感染的治疗 抗病毒化学制剂 核苷类药物：碘苷/疱疹净、阿昔洛韦/无环鸟苷、阿糖腺苷、齐多夫定、双脱氧肌苷、双脱氧胞苷、dTC、拉米夫定、利巴韦林/病毒唑 抑制病毒基因复制 模拟核苷成分掺入病毒基因组 竞争病毒复制酶 抑制病毒基因转录 非核苷类反转录酶抑制剂：柰韦拉平、吡啶酮 蛋白酶抑制剂：沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦 其他：金刚烷胺、甲基金刚烷胺；磷甲酸钠 干扰素和干扰素诱生剂 IFN 干扰素诱生剂 多聚肌苷酸和多聚胞啶酸 甘草甜素 芸芝多糖 中草药防治病毒感染 新抗生素类 治疗性疫苗 治疗性抗体 基因治疗剂 反义寡核苷酸 干扰RNA 核酶