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多孔材料的制备及其在生物传感中的应用 李博，钱卫平’ (东南大学生物科学与医学工程系吴健雄实验室，南京，210096) 摘要：本文通过旋涂法用100nm的Si02胶体制备了不同厚度的Si02多孔结构材料。以 牛血清白蛋白为模式生物分子，进行了材料．生物分子吸附研究。结果表明多孔结构的材 料提高了生物分子在基底表面的吸附总量，从而提高检测的灵敏度，这种多孔材料在生 物传感等方面都具有较大的潜在应用价值“1。 生物传感器对生物分子问相互作用检测的灵敏度很大程度上取决于其在基底表面固 定的数目和密度，以及生物分子问的相互作用。聚苯乙烯微孔板作为普及的固相载体存 在许多优点也存在许多不足。虽然聚苯乙烯微孔板具有良好的生物分子吸附性能，抗体 等生物分子只需通过简单的物理吸附就可以固定在基底表面，但是其用来结合生物分子 的表面积是有限的。由于受到制造工艺的限制[31，用原子力显微镜对微孔板底部进行表 面形貌分析，可以发现表面上存在着呈周期性排列的长条形平行的脊，这些脊是由于聚 苯乙烯微孔板工业化制造过程中所使用的模具造成的。由于聚苯乙烯是强疏水性的物质， 水在其表面的接触角大约为1lO。。当水溶液加入微孔中对，水不能进入脊问，在脊间形 成气泡，水溶液中抗体也就无法进入脊间，只能吸附在脊顶处，因此虽然微孔板中的褶 皱增加了微iL板的表面积，但是实际上减少了抗体可吸附的有效表面积。上述因素很大 程度上制约了采用微孔扳基底的生物传感器的灵敏度。Glazer等人曾用si02溶液通过旋 涂法制各了一种三维多孔材料应用于DNA检测传感器．结果表明这种多层次的三维结构 大大增加了基底材料的表面积，从而提高了DNA探针序列的检测灵敏度…。 1：实验部分 利用旋涂法，通过对粒径为100nm二氧化硅胶体浓度的控制，制各了厚度不同的二 氧化硅多孔结构…。并在二氧化硅膜的上甩上一层很薄的聚苯乙烯膜使得二氧化硅的多 孔结构得以加固。这样我们制备的双层膜体系兼具二氧化硅三维结构的较大表面积和聚 苯乙烯良好的生物分子吸附性能的双重优点。利用反射干涉光谱仪(RIFS)实时原位的 对生物分子(牛血清白蛋白(BSA))在多孔材料上的吸附行为进行了动态监测。并且研究 了生物分子浓度对多孔材料生物分子吸附能力的影响。最后在相同的生物分子浓度下， 比较了多孔材料和超平整材料的生物分子吸附能力的不同。 2：结果与讨论： 本研究首先制备了同时具备较大表面积和良好生物分子吸附性能的Si02．PS双层膜的 体系。通过计算，粒径为100am的Si02球之向的孔隙大小在7．74--20．55nm之问。说明这样 的Si02多孔结构可以既可以容纳较小的生物分子也可以容纳较大的生物分子，从理论上 来讲能够有效的提高一般生物分子在该基底上的固定量。因此我们使用较小的生物分子 牛血清白蛋白进行物理吸附。通过RIFS动态监测了5种浓度的BSA溶液的吸附曲线，结果 表明生物分子浓度和吸附量呈良好的线性关系(图1)。分别采用不同厚度多孔材料，超 85 平整材料为基底N500 lag／ml的BSA溶液，通过RIFS动态监测了其吸附曲线，其结果表明 以多孔材料为基底的传感器的生物分子吸附性能明显高于以超平整材料为基底的传感器 (图2)。采用多孔材料为基底的传感器具有较高的灵敏度，而且制备方法简单，成本较低， 因而在生物传感器领域具有潜在的应用价值。 Idl-川h‰h删㈧rnl- I■…_●¨‰l劬州I” 图1 图2 参考文献： 1．M．Glazer,J．Fidanza，G．Me Gall，etal，Chem．Mater．2001，13：4773 1996，62：149 3．C．J．Roberts，Ultramicroscopy Fabrication-ofSi02PorousMaterialandIts SensingApplication Bo Qian’