多孔酶标板法对微量水样中溶解态活性磷的分析研究.pdf

第三届环境模拟与污粢控制学术研讨会论文 多孔酶标板法对微量水样中溶解态活性磷的分析研究 黄清辉王子健王东红 (环境水质学国家重点实验室，中国科学院生态环境研究中心，北京 100085) 1课题背景 本文是在中国科学院知识创新工程重点项目“长江中下游湖泊富营养化发生机制及控制 资助下进行的。由于本文所研究的溶解态活性磷(sI冲)是湖泊富营养化发生及湖泊水质变 化的重要因子，因此对湖泊水体及沉积物间隙水中溶解态活性磷的研究是我们关心的问题。 然而，在大量的／j、体积闯隙水样品(尤其是柱状沉积物间隙水量，随沉积物深度增加而剧减， 甚至不足lmL)面前，如何迅速完成溶解态活性磷的测定，是本文研究的目的所在。 2研究方法 酶标仪为生物化学及医学研究中常用的仪器，它与分光光度计测定原理不同之处在于： 分光光度计利用水平的光度测定，而酶标仪利用垂直的光度测定：而且利用多孔酶标板，可 测定磷钼蓝化合物在波长为620m处的吸光值来测定水体溶解态活性磷的含量。 3结果与讨论 3．I样品与显色剂用量的影响 图1对三种样品用量条件下显色20分钟时测定的相对标准偏差作了比较，认为最佳用量 为250此水样和40pL显色剂。在这种用量条件下，在加入显色剂后第8、15、22、31、40、 9％，但在低浓度(0 54min时所测结果的相对标准偏差(即变异系数)为O．9％一3 063m∥L) 时，变异系数超过lO％。 O4 40 n3 30 e02 20 O】 lO 邑暑磊暮_^苫luu5基oou O 0 O O2 04 O6 08 4 06 0 010．2 03 0 05 0．7 O8 091 P SmlIdaTd conc∞柏t日n(m掣L) sRP Conc铷臼锄on(mg，L) 左：图1显色时间为20分钟时所测结果的相对标准偏差 右：图2UNICO分光光度计与Multisk蚰酶标仪灵敏度比较 32吸收波长的影响 一蕾l一 第三届环境模拟与污巢控制学术研讨会论文 酶标法(MultiskaII)灵敏度也略高，这是常量分析的优势。由于一般生物医用酶标仪的标准配 置不带880nm波长的滤光片，因此需要通过配置该波长的滤光片或者改用更灵敏的显色剂来 提高灵敏度，进而提高分析数据的精确度。 3．3主要技术指标 (1)最低检测限：以空白样本分析的3倍标准偏差(3Ⅱ)来表示，得到酶标仪对磷的检出限 为2．3嵋P，L(n=64)。 1 P／L～1．O P／L。 (2)适用浓度范围：O mg mg (3)准确度和精确度：采用国际纯粹化学和应用化学联合会提出的将标准偏差和绝对误差综 合一起的精确度概念，则在适用浓度范围内误差为8，1％一153％，可以用于迅速简易分 析，在浓度低于O．】mg／L时，误差为20％~40％，可用于半定量分析。 (4)精密度：采用空白溶液的相对标准偏差，得到酶标仪对磷测定的精