鸡支原体病诊断与防治.docVIP

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班级 高牧医042 学号 200401015008 毕业论文(设计) 题 目 鸡支原体病的诊断与防治近???? 支原体是一种介于细菌和病毒之间的原核生物,在具有自体繁殖和合成自身大分子的微生物中,体积最小,结构也最简单。支原体主要靠寄生生存,寄生于各种动物的体内。鸡的支原体主要有败血支原体(Mycoplasmaga1lisepticum, MG)和滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae, MS),另外还j有其它致病力较低的支原体如火鸡支原体、衣阿华支原体、雏鸡支原体和禽支原体等。鸡支原体病的病原体是禽败血霉形体,属于霉形体目霉形体科霉形体属的一个致病种。一般呈细小球杆状或卵圆形,大小约为0.25--0.5um,姬姆萨染色着色良好,革兰氏染色呈弱阴性。 鸡对本病易感,病鸡和隐性感染鸡是本病的传染源,本病既可以垂直传播又可以水平传播。病原体可以通过鸡咳嗽,喷嚏的飞沫和尘埃经呼吸道传染,被支原体污染的水,饲料,用具也能使本病有一个鸡群传至另一个鸡群。垂直传播可构成代代相传,使本病在鸡群中连续不断的发生。本病在鸡群中传播较为缓慢,但在新发病的鸡群中传播较快。 病鸡初期呈现精神不振,食欲减退或不食,腹泻,.鼻液增多,流浆液性或U液性鼻液,部分病鸡鼻孔周围和颈部羽毛沾污明显,鼻孔堵塞,妨碍呼吸,频频摇头或发出奇声。如鼻甲骨或气管a膜发炎时,u液增多,呼吸困难,打喷嚏。严重时,病鸡呼吸困难伸颈张口喘,呼吸是发出罗音,咳嗽。有时病初流泪,继而眼睑肿胀,眼睑上下粘合,甚至失明。全身症状表现为体温升高,生长发育迟缓,逐渐消瘦。 病理变化 单纯感染败血支原体的病例,可见轻度的鼻和眶下窦炎。自然感染的病例多为混合感染,可见到呼吸翻膜水肿,充血,肥厚,窦腔内充满a液和干酪样渗出物。早期气囊轻度浑浊,外观呈灰白色,水肿,表层有增生的结节状病灶。病情严重时,气囊增厚,囊腔内含有大量干酪样渗出物。眶下窦th膜发炎,窦腔内积有混浊勤液或干酪样渗出物,眶下窦勤膜充血肿胀。病理组织学可见被侵害的组织的勃膜显著增厚,有单核细胞浸润,a液腺增生和it膜下局灶性淋巴组织增生。该病菌容易产生抗药性,而且各地的血清型和流行情况不一样,结合实践,我们做了药敏实验。价、 1材料 1.1.1病料巩文星的患病鸡1.1.2鸡胚蓬莱兽医站提供 1.1.3设备电热恒温箱显微镜超净工作平台1.1.4药品蓬莱村.里集兽医站提供 1.2方法 1.2.1培养基 鸡肉浸出汤85thril鸡血清15thnl 葡萄糖log酵母浸出液1(h-il青霉素G钾100.万单位酚红25m1 鸡鸡肉浸出汤85thnl,加琼脂15g,煮沸溶解,调pH至7.8,高压灭菌,冷却至45摄氏度。 上述成分过滤降菌,预热到45摄氏度,两者混合均匀,立即分装成平板。 1.2.2细菌的分离与培养 在无菌情况下,取有典型症状的鸡只的支气管中下部的渗出液,加液体培养基磨碎制成悬液,接种于液体培养基,放于27.摄氏度的恒温箱中培养5天。 1.2.3镜检 将接种环在酒精灯上火焰消毒,然后粘取鸡的呼吸道下部的渗出液体,均匀的涂抹在玻璃片上,待其自然干燥或在酒精灯上晃动使液体干燥,然后放于过滤盆的两条玻璃棒上,用滴管吸取姬姆萨染色液滴于玻璃片上,5分钟后,倾斜玻璃片倒掉姬姆萨染色液,再在玻璃片上滴上相同剂量的酒精,3分钟后,用生理盐水冲洗掉残留的染色液,冲洗千净后,自然风干或用滤纸吸千水分,放于显微镜下观察。 1.2.4鸡胚的接种 取病鸡的呼吸道无细菌污染的渗出液经卵黄囊接种于7日龄鸡胚。接种在24小时以内死亡的鸡胚为细菌感染死亡;如果是霉形体,在5-7天可以引起鸡胚的死亡,可见到鸡胚的呼吸道有干酪样的渗出物,关节脓肿,肝和脾肿大,心包炎,或全身水肿和肝脏坏死等症状。多次继代后,死亡更加有规律且病变更明显。 1.2.5药敏学实验 将红霉素,强力霉素,链霉素,庆大霉素,氯霉素,丁胺卡那霉素,新霉素,环丙沙星,葱诺沙星的注射液10倍稀释,取直径大约5xru”的.无菌滤纸片分别浸泡于上述溶液中,制成药敏滤纸片,再将这些药敏滤纸片分别置于有鸡血清的琼脂培养基中,放于37摄氏度的恒温箱中培养24小时。多次重复试验,观察抑菌直径,选用合适药物。判定标准:抑菌圈直径6mm以下为不敏感,7M9mm为低敏感,10-15mm为中敏感,16mm以上为高敏感。1.2.6全血凝集反应 在清洁的白瓷板或玻璃板上,滴上2滴着色的已知抗原,然后用注射器刺破被检鸡只的翅静脉,采少量血液,滴1滴于白瓷板上,用牙签将血液与抗原充分混匀,片刻后将白瓷板轻轻的左右摇晃,在1-2分钟内即可判定结果。2’结果 2.1细菌的分离与培养 可见到菌落,典型的菌落呈圆形,微小,透明如露滴状。在40倍光学显微镜下观察时,表面光泽闪光

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