庆大霉素单克隆抗体的制备及试剂盒的配制.pdfVIP

· 42 · 微生物学免疫学进展 2013年第41卷第 1期 ProginMicrobiolImmunolFeb．2013Vo1．41，No．1 ， · 论 著 · 庆大霉素单克隆抗体的制备及试剂盒的配制 潘宪云 ，席仲兴 ，彭林峰 ，张甲菊 ，路东 ，张云涛 (1．兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心，兰州 730046； 2．北京生物制品研究所有限责任公司，北京 100024) 摘要：目的 建立庆大霉素直接竞争酶联免疫吸附分析方法。方法 应用戊二醛法制备庆大霉素完全抗原，通过 杂交瘤技术筛选分泌特异性庆大霉素抗体的杂交瘤细胞株，并建立庆大霉素竞争酶联免疫吸附分析检测方法。结 果 获得3株能稳定分泌庆大霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，建立了庆大霉素竞争酶联免疫吸附分析检测方 法，该方法操作简单具有 良好的线性、特异性和精密度；庆大霉素质量浓度在 1．5625～50．00oong／mL范围内，呈现 良好的线性 ，r 0．9913，50％抑制浓度为(IC，。)为7．37ng／mL，检测限(LOD)为 1．54nrdmL，该试剂盒与链霉素等 8种药物无交叉反应。结论 获得3株能稳定分泌庆大霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，研制的庆大霉素竞争 ELISA检测试剂盒具有 良好的线性、特异性和精密度。 关键词：庆大霉素；完全抗原；戊二醛；单克隆抗体；酶联免疫吸附试验 中图分类号 ：R392．11 文献标志码 ：A 文章编号：1005—5673(2013)01．0042—07 Preparation ofmonoclonalantibodyandestablishmentofdetection methodbyELISA forgentamicin PANXian—yun ，XIZhong·xing，PENGLin—feng，ZHANGJia-ju，LUDong，ZHANGYun．tao ( LanzhouInstituteofBiologicalProductsCo．，Ltd．，CenterforGansuProvincialVaccineEngineering Research，Lanzhou730046，China) Abstract：Objective Toestablishanenzyme—linkedimmunosorbentassay(ELISA)forgentamicin．Methods Glutara1． dehydewasusedascrosslinkerinthepreparationoffullantigensofgentamicin．Hybridomacelllinesthatproducedmono． clonalantibodyagainstgentamicinwereestablishedbythehybridomatechnique．Anenzyme—linkedimmunosorbentassay (ELISA)ofrgentamieinhadbeenestablished．Results Threehybridomacelllineswhichcouldstablysecretemonoclonal antibodyagainstgentamycinwerescreenedoutthroughindirectELISA．Aprocedureofrcompetitiveenzyme—linkedimmuno— analysisofgentamicinwithgood linearity，specificity and accura