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专题二 细胞工程 细胞工程概念 原理和方法、操作水平、目的、分类 细胞全能性 1、概念 2、为什么已经分化的细胞依然具有全能性？ 3、在生物发育过程中，为什么细胞没有表现 出全能性，而是分化成各种组织和器官？ 4、细胞全能性大小比较 细胞全能性大小比较 动物细胞工程 1、常用技术手段 2、基础技术 3、应用 资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 一、动物细胞培养的概念 思 考 思 考 细胞贴壁过程 细胞的接触抑制 思 考 思 考 回 顾 1、动物细胞培养概念、原理 2、动物细胞培养过程 细胞贴壁、细胞接触抑制、原代培养、传代培养 3、动物细胞培养条件 总结 动物细胞培养与植物组织培养的比较 三、动物细胞培养条件 能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？ 1、无菌、无毒的环境 对培养液和培养用具进行无菌处理； 在培养液中添加一定量的抗生素; 定期更换培养液； 2、营养 葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等 动物血清、血浆 3、温度和pH 温度36.5±0.5度，pH7.2～7.4 4、气体环境 培养皿或松盖培养瓶，O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） O2是细胞代谢所必需的。 CO2维持培养液的pH。 合成培养基、液体培养； Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 四、动物细胞培养技术的应用 1、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等； 3、用于检测有毒物质及毒性； 2、动物基因工程离不开动物细胞的培养； 4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、 病理、 药理等方面的研究。 阅读P46-47 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 学习指导第31页 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 资料：为什么体外培养的动物细胞会贴壁？ 贴附是有机体细胞在体内生存和生长发育的基本方式，包括细胞与细胞之间的相互接触和细胞与细胞外基质之间的相互接触两种方式。正是基于细胞的这种贴附生长的特征，使得不同细胞之间结合而形成组织，也使细胞与周围环境之间保持联系。因而有机体的绝大多数细胞必须贴附在某一固相支持物上才能生长增殖。体外培养时多数细胞仍然保持了这种特性，即必须贴附在培养瓶壁等支持物上才能生长增殖。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 资料：为什么贴壁的细胞会接触抑制？ 细胞膜上有糖类和蛋白质共同构成的糖蛋白,也叫做糖被,他在细胞上起识别作用. 当细胞增殖到一定程度,也就是互相挨在一起的时候,糖蛋白识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖,这种现象就叫做接触抑制. 在相同条件下培养的癌细胞，由于没有糖被，对密度依赖性生长抑制失去敏感性，因而不会在形成单层时停止生长，而是相互堆积形成多层生长的聚集体,这种现象也说明恶性细胞的生长和分裂已经失去了控制，调节细胞正常生长和分裂的信号对于恶性细胞不再起作用。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 人工关节——软骨再生 1.第一次手术: 从病人关节软骨中未受损的部分，取出一片约为葡萄干大小的健康软骨组织。 2.分离软骨细胞并经三星期的体外 培养，使细胞数增加约10～20倍。 3.第二次手术: 清理软骨受损的部分，从下方骨