第一章 无菌操作技术实践 课件2 苏教版选修一.pptVIP

考点二 植物组织培养技术 * 7．消毒和灭菌的区别 高温处理 任何物体内外所有的微生物永远丧失其生长繁殖能力 强烈的理化因素 灭菌 物理消毒化学消毒 杀死物体上绝大多数微生物(包括病原微生物和有害微生物的营养细胞) 较温和的物理或化学方法 消毒 常用的方法 结果 条件 考点一 微生物的培养和应用 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子) 强烈的理化因素 灭菌 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法等 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 较为温和的物理或化学方法 消毒 常用的方法 结果 使用方法 (2)三种常用灭菌方法的比较 15～30 min 高压蒸汽灭菌锅内100 kPa,121℃ 培养基等 高压蒸 汽灭菌 1～2 h 干热灭菌箱内，160℃～170℃ 玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等 干热 灭菌 直到烧红 酒精灯火焰的充分燃烧层 接种环、接种针或其他金属工具 灼烧 灭菌 灭菌时间 灭菌条件 适用材料或用具 灭菌 方法 (1)稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水，移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处 (1)接种环的灼烧 ①第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物 ②每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端 ③划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者 注意事项 稀释涂布平板法 平板划线法 方法 平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染 培养 在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子细胞群体——菌落 目的 (2)涂布平板时①涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体 (2)灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连(4)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破 注意事项 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌