ㄧ、实验目的-东海大学.doc

系級：生態二 學號：932524 姓名：范祐誠 組別：第10組 ㄧ、實驗目的 這次實驗我們將從一活的果蠅，藉由載玻片上的染色體觀察其polytene chromosome部位。並使用acetocarmine或aceto-orcein squash方法。 二、材料與方法 Part A: Dissecting the Salivary Glands from the Third-instar Larva 材料：三齡的果蠅蛹、昆蟲生理食鹽水、載玻片、解剖顯微鏡 方法： 滴一兩滴昆蟲生理食鹽水於載玻片上 將一隻三齡的果蠅蛹從培養瓶中移至上步驟之載玻片上 將上述之載玻片連同果蠅放於一黑色背景的解剖顯微鏡下 在正確的放大倍率下，將昆蟲生理食鹽水內的果蠅解剖 Part B: The Ace.tocarmine Squash Method 材料：載玻片、探針、紙巾、光學顯微鏡 方法： 在載玻片中央滴上染劑，使用探針將一食鹽水的通道染色5~15分 把載玻片放在一摺過的紙巾上 用大拇指按壓載玻片使其往內凹，再把載玻片下的紙毛巾移除 若上面步驟沒有做的很完全可以輕輕的敲打以壓碎的腺體 準備將載玻片儲存在助教的地方 用低倍的光學顯微鏡觀察載玻片上的細胞是否位於中央 且其染色體已有展開，若有將物鏡調至高倍並觀察 將所看到的畫下來 Part C: Preparation of Slides for Storage 材料：載玻片、已溶化之石蠟、釘子、乾冰、探針、光學顯微鏡 方法： Semipermanent (to be preserved for several months) 準備一載玻片 用一已溶化之石蠟及無色的釘子，將其沿著coverslip的邊緣擦亮 Permanent (to be preserved for an indefinite time period) 準備一載玻片 將載玻片置於乾冰內直到其結霜 用探針輕輕拍打載玻片 把載玻片置於低倍的光學顯微鏡下看要觀察的東西是否還位於載玻片上 假如要觀察的東西黏附在coverslip便可用此代替載玻片 繼續做下面的步驟 將玻片置於100％ethanol、1:1 ethanol : xylene、xylene各3分鐘 把一小的Permount放在coverslip上 三、解釋名詞 Ploytene chromosomes 多線染色體。巨大染色體的一種，在某些雙翅目昆蟲幼蟲的某些組織中(例如唾腺)中形成，由一對聯會同質染色體連續增殖，具有在光學顯微鏡下可觀察到的明暗相間的帶。 Endomitosis 核內有絲分裂。核內多倍體中發生有絲分裂的形式或染色體增殖而無絲分裂。 Chromosome inversions 染色體倒轉。染色體的一段斷裂，轉180°後再重新接合，結果使基因的順序顛倒。減數分裂前，染色體糾纏在一起可能形成一個圈環(loop)，若圈環發生斷裂經旋轉再接合就可能產生倒轉 Chromosome deletions 染色體缺失。染色體片段可能包含一個或多個基因發生缺失，會導致突變或遺傳異常，缺失可能發生於任何一條染色體上的任何位置。 Chromosome translocations 染色體易位。兩條不同的染色體斷裂後彼此交換又重新接在一起，可能自然發生(ex:在精卵形成的過程中自發性產生)或人工誘導(ex:X光照射)。 Chromosome insertions 染色體插入。一條染色體中的某一片段轉到另一條染色體上插入，這種插入若發生在一對同源染色體之間，則會導致其中一條染色體上某片段發生缺失。但插入若發生在非同源染色體之間，則造成兩者都出現畸變。 Lampbrush chromosomes 刷型染色體。多種脊椎動物的卵母細胞核內延長的減數分裂時所形成的二價染色體類型。在某些兩棲類動物尤為明顯，其中的染色體處於擴展狀態，具有的染色質環從染色體的每個染色質摺疊出來，外表像瓶刷，染色質活躍被轉錄，可在電子顯微鏡下觀察出來。 Chromosome mapping technique 染色體圖技術。表示各基因再染色體上位置圖解的一種技術。 討論： 問題： What is the most commonly observed modification of polytene chromosomes and what macromolecule is synthesized during the modification? 答：polytene chromosome常在不同的組織被發現(ex:唾腺、中腸、直腸、malpighian排泄管…等)。而通常在polytene chromos