new第3章蛋白质化学规范.ppt

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蛋白质化学 第3章 氨基酸 What do proteins do? 蛋白质的元素组成 蛋白质一般含碳50%~55%、氢6%~8%,氧20%~23%,氮15%~18%,硫0%~4%。 有些蛋白质还含有微量的磷、铁、锌、铜、钼、碘等元素。 其中氮的含量在各种蛋白质中都比较接近,平均为16%。 每1g氮相当于6.25g的蛋白质 有密码子编码的氨基酸——22种 1986年,英国Chamber及德国的Zinoni等发现UGA编码硒半胱氨酸,命名为第21种天然氨基酸 2002年,美国的Srinivasan和Hao等发现UAG编码吡咯(luo)赖氨酸,为第22种天然氨基酸。 一、氨基酸的通式 非极性,脂肪族 极性,脂肪族,不带电荷 芳香族 带有电荷 参与蛋白质组成的20种基本氨基酸,在可见光区域都没有光吸收。 但在远紫外区( 22nm)均有光吸收。在近紫外光区域(220~300nm)只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸收能力。它们含有苯环共轭双键系统。(ε 表示物质的摩尔消光系数) Try: λmax =275nm; ε275 =1.4×103 Phe: λmax =257nm; ε257 =2.0×102 Trp: λmax =280nm; ε280 =5.6×103 蛋白质由于含有Tyr、Phe、Trp这些氨基酸,也有紫外光吸收能力,一般最大吸收在280nm处。 杂环氨基酸(组氨酸、脯氨酸、色氨酸) 1、非极性R基氨基酸 八种:Ala、Val、Leu、Ile Phe、Trp Met、Pro 3、带正电荷的R基氨基酸 3、碱性氨基酸: Lys、Arg、His在pH7时带净正电荷 His:在pH6.0时,his的R基50%以上质子化,但pH7.0时,质子化的分子不到10%。 His是R基的pK值在7附近的唯一的氨基酸 附:不常见的蛋白质氨基酸 存在于少数蛋白质中特有的氨基酸,是在蛋白质生物合成后由相应的基本氨基酸衍生来的。 胶原蛋白Collagen是人体内含量最丰富的蛋白质,占全身总蛋白质的30%以上 胶原肽链的氨基酸组成独特,甘氨酸含量1/3,脯氨酸及羟脯氨酸各占10%,其中羟脯氨酸在动物组织中,仅见于胶原, 儿童的皮肤以Ⅲ型为主,到了成年皮肤以Ⅰ型为主,随着年龄增长,交联键日益增多,胶原纤维亦越紧密与皮肤老化变僵硬相关,因此,皮肤表现松弛。 胶原蛋白与许多人类疾病相关。如骨形成不全(osteogenesis?imperfecta)或称脆骨病,即是由于胶原蛋白生物合成或转录后的修饰作用障碍所致 非蛋白质氨基酸 不是蛋白质的组成成分 以游离或结合的形式存在于生物界 大都是常见氨基酸的衍生物 还有些是β-,γ-,δ-, 和D-型氨基酸 一些是代谢中间产物,如瓜氨酸、鸟氨酸; γ-氨基丁酸等 当人暴露在有碘131的环境下且甲状腺未达到碘饱和时,它会吸收一定量的碘131。 所以碘盐防辐射,需要在暴露在碘131环境前服用大量的稳定碘,让甲状腺达到碘饱和,就不会再吸收放射性的碘131了。 D-型 氨基酸 三、 氨基酸的理化性质 氨基酸等电点的计算 为了抑制微生物的生长,水煮笋的pH值大多会控制在5.0-5.3,这样的环境恰恰对应于酪氨酸的等电点。 结果就是,包装水煮笋上出现了像石灰一样的沉淀。 纸层析 用滤纸为支持物进行层析的方法,称为纸层析法。 纸层析所用展层溶剂大多由水和有机溶剂组成。滤纸纤维与水的亲和力强,与有机溶剂的亲和力弱,因此在展层时,水是固定相,有机溶剂是流动相。 (四)分配柱层析 填充物为亲水性的不溶物质如纤维素、 淀粉、硅胶等; 收集的组分用茚三酮 显色定量。 (六)高效液相层析 固定相支持剂颗粒细,表面积大; 采取高压,洗脱速度快。 1、甘氨酸的解离常数是pK1=2.34, pK2=9.60 ,它的等电点(pI)是( ) A、7.26 B、5.97 C 、7.14 D、10.77 2、必需氨基酸是对( )而言的。 A、植物 B、动物 C、动物和植物 D、人和动物 3、在下列所有氨基酸溶液中,不引起偏振光旋转的氨基酸是( ) A、丙氨酸 B、亮氨酸 C、甘氨酸 D、丝氨酸 4、天然蛋白质中含有的20种氨基酸的结构( ) A、全部是L-型 B、全部是D型 C、部分是L-型,部分是D-型 D、除甘氨酸外都是L-型 5、谷氨酸的pK’1(-COOH)为2.19,pK’2(-N+H3)为9

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