携带人金属蛋白酶组织抑制剂1重组腺病毒的构建及在人脐静脉内皮细胞中的表达.pdfVIP

重庆医学2013年 3月第42卷第 8期 841 · 论 著 · 携带人金属蛋 白酶组织抑制剂 1重组腺病毒的构建及在 人脐静脉 内皮细胞中的表达 李 汇 ，毛用敏 ，赵莉莉。，崔让庄 ，王佩显 (1．天津医科大学 300070；2．天津市胸科医院 300051) 摘 要 ：目的 构建携带人金属蛋 白酶组织抑制剂 1(TIMP1)的重组腺病毒 AdV—hTIMP1，感染体外培养的人脐静脉 内皮细 胞 CRL一1730，观察其 mRNA表达情况。方法 应用 AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统在大肠埃希菌 BJ5183中通过 同源重组 构建Ad—hTIMP1和对照Ad—Track。阳离子脂质体法将重组腺病毒转染到人胚胎肾细胞(HEK293T)中进行包装和扩增。纯化 后 PCR鉴定 hTIMP1目的基 因，0D。。法测定滴度 ，透射 电镜观察腺病毒形态。将人脐静脉 内皮细胞 CRL-1730分为3组，空白对 照组、T