研究黄芪精中黄芪甲苷重点.pptVIP

扬子江药业集团 扬子江药业集团 一．产品概况 黄芪精是我公司开发研制的虚症类OTC产品，为补血养气，固本止汗之良药。其疗效佳，口感好，携带方便。 二.小组概况(一)小组简介  (二)QC小组成员一览表 三．选择课题 1.2.容易出现鬼峰 1.3.检测偏差大，方法的准确性较差 1.4.薄层板展开耗时长，且一块薄层板只能点一个批号的供试品，检测批次很有限，导致出成品检测报告的周期较长。 1.5.按照部颁标准，以薄层扫描法 （TLCS）对黄芪精中黄芪甲苷进行含量测定，结果如下。 2.课题确定 四.设定目标 拟制定黄芪精中黄芪甲苷含量测定的新方法的回收率不低于90%；含量测定结果的相对平均偏差小于2.0%。 五．提出并选择最佳方案 1.提出方案 （1）HPLC-UV（高效液相色谱-紫外检测器）法 （2）HPLC-RI（高效液相色谱-示差折光检测器）法 （3）HPLC-ELSD（高效液相色谱-蒸发光散射检测器）法 2.方案的分析、评估与确定 3.确定方案的采用顺序 （3）HPLC-ELSD（高效液相色谱-蒸发光散射检测器）法 （1）HPLC-UV（高效液相色谱-紫外检测器）法 （2）HPLC-RI（高效液相色谱-示差折光检测器）法 六．制定对策 七．对策实施 实施一：色谱条件的确定 1.仪器与试药 Agilent1100高效液相色谱仪；Attech2000蒸发光散射检测器；梅特勒AG285电子天平。 黄芪精；天津农药总厂D101型大孔吸附树脂；甲醇、乙腈为色谱纯；95%乙醇为分析纯；水为超纯水。 2.对照品溶液的制备 取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解，配制成0.1 mg?ml-1的对照品溶液。 3.供试品溶液的制备 精密量取本品10ml，置分液漏斗中，加水10ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇10ml使溶解，0.45 μm有机系微孔滤膜滤过，即得。 4.色谱条件的确定 因此，可以选择Agilent XDB-C18柱（4.6×150 mm，5 μm）、以乙腈-水 (32：68)为流动相，流速为1.0 ml·min-1进行后续试验。 实施二：供试品前处理方法的选择 　1.供试品溶液的制备 　精密量取本品10ml，置分液漏斗中，加水10ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用A％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用B％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。 　2.提取分离条件的确定 　收集上述水液和各拟弃去的乙醇洗脱液，蒸干，加甲醇适量使溶解，得溶液C按照上述色谱条件分别进样20 μl，记录色谱峰面积。 试验结果表明：（1）弃去的水液中目标物无损失；（2）当A=40，即采用40%乙醇洗脱时，目标物有损失；（3）当B=60，即继续采用60%乙醇洗脱时，则目标物洗脱不完全。 因此确定A%、B%的最佳值分别为：30%、70%，并以此值确定的提取分离条件进行后续方法学的验证。 实施三：线性关系的确定 取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解并稀释至8个系列浓度, 分别进样10 μl，测定峰面积，以对照品浓度X(mg?ml-1)的lg值为横坐标，峰面积积分值Y的lg值为纵坐标进行线性回归，得回归方程： Y=0.1819X+1.9515 r=0.9992 实施四：精密度试验 　取同一供试品溶液，在上述色谱条件下重复进样6次，每次10 μl，测得黄芪甲苷色谱峰峰面积平均值为978.57883，RSD为0.5%。 实施五：重复性试验 实施六：稳定性试验 　取同一供试品溶液，于0、2、4、6、12、 　14 h分别精密吸取10 μl注入液相色谱仪分 　析，测得峰面积值，计算RSD。 实施七：方法回收率试验 精密吸取已知含量同一批号样品5 ml，6份，分别精密加入已知浓度的对照品溶液5 ml，制备溶液，分别进样10 μl，测得峰面积值， 计算平均回收率和RSD。 评　　价 1.初步评价 建立了黄芪精中黄芪甲苷含量测定的新方法，方法学研究符合《中国药典》2005年版（一部）附录“中药质量标准分析方法验证指导原则”。 2.综合评价 取本品3批，将两法的含量测定结果进行对比。 评价：采用HPLC- ELSD法测定黄芪精中黄芪甲苷含量比采用TLCS法测定时的相对平均偏差小，测定的结果较理想。 八.效果检查 1.效果验证 取不