桉叶油对体外培养人绒毛膜细胞增殖的影响.pdf

山东医药 2013年第53卷第 7期 桉叶油对体外培养人绒毛膜细胞 增殖的影响 向 涛 ，李小燕 ，余永莉 ，程 秦 ，许本宏 ，张亚玲 ，李啸红 (1珠海市金湾区计划生育服务站，广东珠海519041；2遵义医学院珠海校区) 摘要：目的 观察桉叶油对体外培养人绒毛膜细胞增殖的影响，为其在食 品添加及药品开发中的应用提供依 据。方法 胰酶消化法收集正常妊娠6～8周人绒毛膜细胞，随机分为桉叶油组和对照组，其中桉叶油组分别加 入桉叶油使终质量浓度分别为0．75、0．15、0．015、0．0015mg／mL；对照组加入70％乙醇 10 L／mL。采用台盼蓝染 色，细胞计数法绘制细胞生长曲线；桉叶油处理后 12、24、36h以MTF法测定细胞增殖抑制率，12、24h时同时以流 式细胞仪测定细胞周期和凋亡情况。结果 ①随培养时间延长，两组人绒毛膜细胞数量均逐渐减少 ，其 中0．75 mg／mL桉叶油组人绒毛膜细胞生长明显受抑 ，与对照组相比有显著差异；其余桉叶油各组绒毛膜细胞生长情况与 对照组相比无显著差异。(至)0．75mg／mL桉叶油组人绒毛膜细胞增殖抑制率显著高于对照组(P0．05)，其余桉叶 油各组人绒毛膜细胞增殖抑制率与对照组相比无显著差异。③桉叶油作用 12h后 ，0．75ms／mL桉叶油组G。一G 期细胞减少、s期细胞增多、G 一M期细胞减少、凋亡率明显增高，与对照组相 比，P0．05；与对照组相比，其余桉 叶油各组G。一G，期、G2～M期细胞比例有显著差异(P0．05)，S期细胞比例及凋亡率无显著差异。桉叶油作用 24h后 ，与对照组相比，0．75ms／mL桉叶油组G。一G 期细胞比例减少、S期细胞比例减少、G：～M期细胞比例增 多、凋亡率升高(P0．05)；其余桉叶油各组S期细胞 比例均显著升高(P0．05)，G 一M期细胞比例及凋亡率均 无明显变化。结论 质量浓度≤0．15ms／mL的桉 叶油对人绒毛膜细胞无明显生长抑制、细胞毒性及诱导凋亡的 作用，但可影响细胞周期，且此影响可能随作用时间不同而异；此为桉叶油在食品添加及药物开发中的应用提供了 实验依据。 关键词：桉叶油；人绒毛膜细胞 ；细胞增殖 ；细胞凋亡 doi：10．3969／j．issn．1002—266X．2013．07．004 中图分类号：R737．33 文献标志码 ：A 文章编号 ：1002-266X(2013)07-0011-04 EffectsofeucalyptusoiIonthegrowthofhumanchorioniccellsculturedjnvitro XIANGTao，LIXiao—yah，YUyo 一li，CHENGQin，xuBen—hong，ZHANGYa—ling，ⅡXiao—hong (1fin 几AreaFamilyPlanningServiceStation，Zhuhai519041，P．R．China) Abstract：0bjective Toinvestigatetheeffectofeucalyptusoilonthegrowthofhumanchorioniccellscuhuredin vitro，andtoprovidethebasisforitsapplicationinfoodadditivesanddrugdevelopment．Methods Thenormalpregnancy (in6—8weeks)humanchorioniccellswerecollectedwiththetrypsindigestionmethod，thenrandomlydividedintoeucalyp- tusoilrgoupandcontrolgroup，theeucalyptusoilgroupwasgiveneucalyptusoiltomakefinalmassconcentrationreach 0．75，0．15，0．015，0．0015mg／mL；Thecontrolrgoupwastreatedwith70％ ethanol10 L／mL．Thecellrgowthcurve wasdrawnwiththetrypanbluestainingandcellnotation；MTrmethodwasusedofrdeterminationofcellproliferationinhi— b