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根癌农杆菌介导遗传转化稻曲病菌.pdf
根癌农杆菌介导遗传转化稻曲病菌
张震，杜新法’，柴荣耀，毛雪琴，邱海萍，王艳丽，王教瑜，孙国昌
(浙江省农科院植物保护与微生物所，浙江杭州310021：
’通讯联系人，Email：duxf@zaas．org)
【摘要】利用根癌农杆菌介导转化系统，对稻曲病菌分生孢子进行转化，通过潮霉
素抗性筛选转化子。农杆菌经乙酰丁香酮预先诱导，转化效率大约在390-450个转
化子／106个孢予。PCR检钡IJHPH基因表达盒，结果显示被测转化子基因组中均成功整
合了目的片段。同时，在488nm下这些转化子都具有荧光。利用根癌农杆菌成功转
化稻曲病菌，这为进一步研究稻曲病菌致病分子机制的有力工具。
关键词：稻曲病菌；根癌农杆菌：转化
transformationof the
Agrobacteriumtumefaciens—mediated
of virens
phytopathologyUstilaginoidea
ZHANG
Zhen，DUXin-fa，CItAI
Rong-yao，MAOXue-qin，QIUHal—ping，WANG
Yah—li，WANG
Jiao-yu，SUNGuochang
(InstitutePlantProtectionand Academe
of of Sciences,
Microbiology,ZhejiangAgricultural
Hangzhou，310021．China；‘Correspondingauthor，Email：du．xf@zaas．ore)
Abstract：Conidiaof virensweretransformedto B
Ustilaginoidea hygromycin
a
resistance transformation a
Agrobacterium system
by tumefaciens-mediated using
vector stable
binaryplasmid pBIG2RHPH2一GFP—GUS．AtMTyielded hygromycin
B-resistant 200·27010。conidia)，afterstrainC58C1with
clones(averageper pre·culture
inthetransformantswaschecked
AS．The ofthe casket
presencefragmentof枷gene
PCR．AndalsoalltestedtransformatsshowedEGFPfluorescencein in
by mycelium
transformationan
tumefaciens-mediatedprovidesopportunity
488nm．Agrobacterium
for studiesofthemolecularofthe
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