棉花纤维特异或优势表达基因的分离和功能研究.pdfVIP

-棉花纤维特异或优势表达基因的分离和功能研究 andFunctionalofGenes Isolation，CharacterizationAnalysis Specifically or CottonFiber PreferentiallyExpressedduring Development 刘迪秋，涂礼莉，朱龙付。曾范昌。郭小平．张献龙 (华中农业大学植物科技学院，作物遗传改良国家重点实验室，湖北武汉430070) 棉纤维由棉花胚珠外珠被表皮层的单细胞发育而成，其分化和发育过程可分为纤维原始细胞分 化与突起、纤维细胞的伸长或初生壁的加厚、次生壁的加厚和脱水成熟四个时期。分子生物学上，棉 花纤维细胞已成为研究植物细胞生长发育。如细胞伸长和细胞壁生物合成以及纤维素生物合成的理 想模型。如同其他组织一样，棉花纤维组织活跃地表达着大量基因，这些纤维特异或优势表达基因必 定在不同时间以及不同路径中控制纤维的生长发育。另一方面，克隆出棉纤维特异表达基因的调节 因子，如启动子、增强子和相应基因中决定纤维特性的序列，也会在棉纤维遗传工程中起到至关重要 的作用。 DPA)和开化后20天(20 中差异表达。进一步的测序和序列分析显示10DPA和20 ESTs，其中13条同时出现在两文库中。序列同源性表明两差减文库富含许多已报道的棉纤维特异表 的基因，几个不同的阿拉伯半乳糖蛋白基因、可能的赤霉素调控基因、液泡膜以及质膜内在蛋白基因 等，Northern杂交证实它们都是棉纤维特异或优势表达基因。并且，它们的表达类型也是多样化的： 来自10DPA差减文库的几个基因富集于发育早期的棉纤维细胞；还有一些基因在伸长期与次生壁 加厚期的转换期转录水平达到最大；而一些从20DPA差减文库中筛选出来的基因在次生壁加厚期 优势表达。虽然只是一个小规模的基因分离研究，但是结果表明两个文库富含的基因都在棉纤维发 育过程中大量表达，同时也暗示它们包括在控制纤维发育的基因网络之中。为了进一步研究这些纤 维优势表达基因在棉纤维发育过程中的功能，我们利用5’RACE和3’RACE扩增获得了六个基因的 全长eDNA，它们分别是4个不同的阿拉伯半乳糖蛋白(axabinogalaetanproteins，AGPs)基因和两个主 育早期特异表达，而四个AGPs基因在伸长期与次生壁加厚期的转换期或者只在次生壁加厚期特异 族的方式存在。目前，我们正在进行RNA干涉实验以验证这些基因在棉纤维发育过程中的准确功 能，同时分离这些纤维特异表达基因的启动子并研究其表达特性。