土壤酶活性測定方法.docVIP

土壤酶活性测定方法 土壤脲酶的测定方法 脲酶存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。它是一种酰胺酶作用是极为专性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和。土壤脲酶活性，与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。根际土壤脲酶活性较高，中性土壤脲酶活性大于碱性土壤。人们常用土壤脲酶活性表征土壤的氮素状况。 土壤中脲酶活性的测定是以脲素为基质经酶促反应后测定生成的氨量，也可以通过测定未水解的尿素量来求得。本方法。1）甲苯 2）10%尿素：称取10g尿素，用水溶至100ml。 3）柠檬酸盐缓冲液（PH6.7）：184柠檬酸和147.5氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH调至6.7，用水稀释至1000。 4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5苯酚溶于少量乙醇，加2甲醇和18.5丙酮，用乙醇稀释至100（A），存于冰箱中；27NaOH溶于100水（B）。将AB溶液保存在冰箱中。使用前将液各20混合，用蒸馏水稀释至100。 5）次氯酸钠溶液：用水稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定。 6）氮的标准溶液： 精确称取0.4717硫酸铵溶于水并稀释至1000ml，得到1ml含有0.1mg氮的标准液称取5g以等体积的水代替基质，其他操作与样品实验相同。整个实验设置一个对照不加土样，其他操作与样品实验相同以检验试剂纯度以24小时后土壤中NH3－N