第八章遗传的分子基础选编.pptVIP

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总之,DNA复制分子机制的基本特点是: 1、复制是半保留的。(方式) 2、复制起始于细菌或病毒的特定部位,真核生物有多个起始点。(起点) 3、复制可以朝一个方向,也可以向两个方向进行,后者更为常见。(方向) 4、复制时,DNA的两条链都从5′端向3′端延伸。(延长) 5复制是半不连续的,前导链是连续合成的,后随链是不连续合成的,即先合成短的冈崎片段,再连接起来构成后随链。(半不连续) 6、冈崎片段的合成起始于一小段RNA引物,这一小段RNA以后被酶切除,缺口由脱氧核苷酸补满后再与新生DNA链连接在一起。(刚起片段的链接) 7、复制有多种机制,即使在同一个细胞里,也可因环境——酶的丰富程度、温度、营养条件等的不同而具有不同的起始机制和链延长的方式。(复杂性) 第三节基因的本质 一、基因和DNA 基因是DNA分子的一个区段,包含500~6000bp,也就是说基因是一段含特定遗传信息的核苷酸序列。 证明方法: 测定基因的核苷酸顺序和由它所决定的蛋白质的氨基酸顺序,根据遗传密码,比较两者的顺序是否相对应。 碱基顺序的测定: cDNA + 质粒 大肠杆菌 DNA RNA 32P-T 32P-TCAGCCCAT 32P-TCAGCCCATGGT 32P-TCAGCCCATGGTT 化学处理,使DNA片段在含T的地方切断 或用另3种不同的化学降解在C、A、G处随机切断 32P-TCAGCCCATGGTTAAGA 5′端用32P标记 DNA片段 DNA随机片段混合物用同一凝胶进行电泳 分别产生DNA随机片段 TCAGCCCCATGGTTAAGA 片段长度依电泳方向递减 DNA片段碱基顺序的测定 T C A G 肽链氨基酸顺序的测定: PITC反应、层析法、肽链氨基酸自动测序仪。 例如:噬菌体MS2遗传物质为RNA,同时还是mRNA ,含3659个碱基,3个基因,编码“A”蛋白,外壳蛋白和RNA复制酶 ①RNA的核苷酸顺序和蛋白质的氨基酸顺序可以对应。 ②基因的起始密码子是AUG,而终止密码子是UAA、UAG、UGA。 ③基因与基因间有基因间区域。 (一)基因概念的发展 阅读框(open reading frame): 从起始密码子开始到终止密码子为止的连续核苷酸密码序列。 1、割裂基因(断裂基因 split gene): 真核类的基因的编码顺序由若干非编码区域所隔开,使阅读框不连续。这种基因称______。 内含子(intron): 转录后被切除,从而不翻译为蛋白质的部分。 外显子(exon或extron): 转录后不被切除,继而翻译为蛋白质的部分。 斜线:与转录的调节有关; 小点:外显子; 空白:内含子 控制人的血红蛋白分子的基因 2、重叠基因(overlapping gene): 基因中包含着基因。 噬菌体φX174,单链环状DNA,碱基数不到5400,编码9种蛋白质 (二)基因的基本特征与DNA特性: 1、基因的自体复制: 细胞分裂时,从一个基因自体复制为全同的两个基因,在DNA分子水平上是DNA分子自体催化时,从一个DNA分子复制为全同的两个DNA分子。 2、基因决定性状: 某一基因存在,决定某种酶或蛋白质的合成,通过生理生化过程出现某一性状。在DNA分子水平上是DNA分子异体催化时,某一区段的核苷酸顺序互补地决定mRNA的核苷酸顺序,转而专一性地决定蛋白质的氨基酸顺序。 3、基因的突变: 基因很稳定,但有时会发生突变,突变的基因通过自体复制一代代的传递下去。在DNA分子水平是DNA分子很稳定,但某核苷酸序列有时会改变,改变了的核苷酸序列通过复制有能稳定地保持下去。 例1:生化突变型与一基因一酶说 前体 鸟氨酸 瓜氨酸 精氨酸 菌株III:自前体到鸟氨酸的反应受阻。 菌株II:自鸟氨酸到瓜氨酸的反应受阻。 菌株I:自瓜氨酸到精氨酸的反应受阻。 生长 生长 生长 — 生长 生长 — — 生长 菌株Ⅰ 菌株Ⅱ 菌株Ⅲ 精氨酸 瓜氨酸 鸟氨酸 添加的 aa 菌株 链孢霉精氨酸依赖型的不同菌株对添加的氨基酸反应 (a)实验结果染色体放射自显影的图示 (b)按半保留复制预期DNA在复制过程中标记情况 2、放射自显影技术证明 ⑴放射自显影技术观察染色体(蚕豆根尖放射自显影实验) ⑵放射自显影技术观察DNA   复制叉:   复制正在发生的位点 (双螺旋DNA两条亲本链分开使复制能进行的部位)。   复

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