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高效离子交换色谱 张玉 3160246 一、高效阴离子交换色谱测定中性糖含量 1.前言 在禾本科植物木质素的分级分离及结构表征的研究中，通常要对分离出的木质素进行成分分析。禾本科植物主要由纤维素、半纤维素、木质素组成，在成分分析过程中，经水解，与木质素连接在一起的纤维素、半纤维素水解产生葡萄糖、阿拉伯糖、木糖等中性单糖。通过测定单糖含量，可得知聚糖含量，完成成分分析。 目前用于糖的分离和含量测定的主要方法是高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法 (HPAEC-PAD)。 2.生物质中的糖 纤维素，半纤维素水解主要产生葡萄糖、木糖、阿拉伯糖等单糖。 上图中分别是纤维素和半纤维素的结构式。 图中1、2、3分别是β-D-吡喃型葡萄糖、 β-D吡喃型木糖、α-L呋喃型阿拉伯糖的哈瓦斯式结构式。 糖的pKa值为 12 ～14，是一种弱酸，在强碱性介质中会部分或全部以阴离子形式存在, 因而可以用较强的碱性溶液作为流动相进行阴离子交离。 3.固定相 用于高效阴离子交换色谱分析糖所用的固定相主要是阴离子交换树脂。典型的固定相，是以乙基乙烯基苯-二乙烯基苯聚合物为基核, 表面附聚具有季铵功能基的乳胶颗粒。 这种有机高聚物在 pH 0～14的溶液和与水互溶的有机溶剂中稳定, 可以以强酸或者强碱性溶液做流动相，可用有机溶剂清洗疏水性有机化合物以消除其对色谱柱的污染。 这种固定相主要分为 PA与 MA两种类型。 PA型亦称为薄壳型，其树脂的基核没有孔, 离子交换功能基团附聚于基核的表面。而 MA型是大孔的基核, 具有大的表面积, 因此具有高的交换容量。 4.流动相 由于糖的酸性弱, 要使其在流动相中以离子形态存在, 流动相必须是强碱性溶液。用阴离子交换色谱分析糖所用的淋洗液主要是氢氧化钠或氢氧化钠和乙酸钠的混合液。 5.测定条件 色谱柱：CarboPac PA1 (4 × 250 mm)阴离子交换分离柱 淋洗液：0.3mol / L NaOH溶液 淋洗速度：0.5 mL/ min 检测条件：积分脉冲安培检测 二、离子交换色谱 1.概念 离子交换色谱法是利用离子交换树脂作为固定相，以适宜的溶剂作为流动相，使溶质按照它们离子交换亲和能力的不同而得到分离的方法。 2.基本原理 离子交换色谱的固定相一般为离子交换树脂，树脂分子结构中有许多可电离的活性中心，待分离组分中的分子会与这些活性中心发生离子交换，产生交换平衡，从而在流动相和固定相之间形成分配，由于不同的离子交换能力不一样，待分离的各种离子在树脂柱中虽流动相的移动速度也不一样，最终实现分离。 3.离子交换基本过程 （1）初始稳定状态 （2）离子交换过程 （3）洗脱过程 （4）介质的再生过程 4.优点 （1）分析速度快：可在数分钟内完成一个试样分析。 （2）分离能力高：在适宜的条件下，可使常见的各种阴离子混合物分离。 （3）分离混合阴离子的最有效方法。 （4）采用塑料管线，接头，玻璃分离柱，抗腐蚀能力强。 5.离子交换树脂 （1）构成 由苯乙烯和而乙烯基苯聚合而成的网状结构，不溶于水和有 机溶剂，性质稳定。苯乙烯组成长链，乙烯基苯为交联剂。 （2）分类 ① 阳离子交换树脂 —— 可交换的离子为阳离子。 氢型，钠型 强酸型，弱酸型，中强酸型 ② 阴离子交换树脂 —— 可交换的离子为阴离子。 氢氧型，氯型 强碱性（季铵基团） 6.流动相 （1）一般为盐类的缓冲水溶液（有一定的pH值）。 （2）对分离的影响 流动相主要影响组分离子和交换基团形成离子对的过程。 流动相用去离子水溶解淋洗剂配制而成。 7.应用 （1）除去干扰离子 （2）测定盐类含量 （3）痕量元素富集